Charlie berbicara tentang bagaimana dia, seorang sarjana kristal akademis, dilahirkan kembali sebagai CEO perusahaan bioteknologi. Dia telah menerapkan desain obat berbasis struktur untuk menciptakan oba t-obatan untuk kanker, asam urat, Marlburg, hemangiema Ebola, influenza, dan hemangiema herediter. Dalam karirnya, ia memainkan kepemimpinan dalam inisiatif NASA untuk budidaya kristal protein di luar angkasa. Ia juga menjabat sebagai Ketua ACA (1987) dan Pemimpin Redaksi Acta Crystallographica (1987-1996).
Saya seharusnya menjadi ahli bedah ortopedi, bukan kristalisasi. Ayah saya adalah ahli bedah ortopedi yang terkenal di Dalam, North Carolina, tempat saya dilahirkan dan dibesarkan. Karena saya berhat i-hati, saya pikir saya akan mengambil alih tanda ayah saya. Saya adalah yang kedua dari lima bersaudara. Dia menghabiskan masa kecilnya di Dalam, kecuali untuk tinggal jangka pendek di Fort Blug, North Carolina, tempat ayahnya ditempatkan selama perang dan Tomas Ville, Georgia. Saya ditakdirkan untuk pergi ke Universitas Duke, di mana orang tua, kakek, dan banyak kerabat saya kuliah. Ibu saya lulus dari Universitas Duke pada tahun 1936 di Phi Beta Kappa. Ayah saya pergi ke fakultas Universitas Duke dan School of Medicine. Secara khusus, orang tua saya dengan jelas menyatakan bahwa saya hanya akan membayar untuk pergi ke Universitas Duke, jadi saya memutuskan untuk pergi ke Universitas Duke. Untungnya, Universitas Duke adalah pilihan yang cukup bagus untuk saya.
Ayah saya adalah seorang praktisi swasta dan profesor bedah ortopedi di Universitas Universitas Duke. Ibu saya bertanggung jawab atas keuangan ayah saya. Setelah perang, ahli bedah ortopedi sangat tidak biasa, jadi ayahnya akhirnya memeriksa banyak petani setempat. Ayah saya terkenal di Dalam County dan Orange County. Hiburan ayahnya yang paling hiburan adalah berburu dan memancing, yang merupakan kegiatan yang sangat produktif di pedesaan Carolina Utara pada saat itu. Ayah saya selalu memiliki file berburu di kantor dan mendapatkan izin untuk berburu tanah pasien setiap hari. Tampaknya kami hampir bebas untuk berjalan di seluruh negeri untuk berburu puyuh dan merpati. Itu juga memiliki rumah sederhana di sepanjang pantai North Carolina, yang belum dikembangkan pada saat itu, di mana berburu bebek itu indah. Memancing di danau lokal dan pantai hampir selalu bermanfaat. Itu adalah era yang indah bagi saya yang tumbuh di selatan.
Ayah saya memiliki berbagai kegiatan filantropis yang sangat umum bagi dokter pada saat itu. Pada akhir pekan, ia sering melakukan operasi di rumah sakit amal lokal yang sangat primitif. Suatu akhir pekan, saya ingat bahwa ayah saya meminjam latihan tangan dari set alat junior saya, mensterilkan autoclave dan menggunakannya untuk operasi. Dia terkadang membawa saya ke ruang operasi dan menjelaskan secara rinci operasi. Ada pembedahan yang saya ingat khususnya. Itu pertengahan musim panas. Tentu saja tidak ada yang lebih keren. Seorang wanita besar dan gemuk telah mematahkan pinggulnya dan harus memperbaikinya dengan paku. Saya berada di topeng dan gaun, dan perawatan saya sangat kasar karena ukuran pasien. Untuk pertama kalinya, saya ingat bahwa saya mulai bertany a-tanya apakah saya bena r-benar ingin menjadi ahli bedah ortopedi.
Ibu saya memiliki pengaruh kuat dalam hidup saya sejak saya sadar. Ibu saya sangat aktif di komunitas Dalam dan tampaknya sedang mengerjakan pertumbuhan saya untuk pertumbuhan saya. Ibu saya tidak mengatur hidup saya secara detail, dan selalu mendukung saya ketika saya tidak layak. Saya awalnya menghadiri Calvar School (sekarang berganti nama menjadi Dalam Academy). Namun, ibunya adalah pendukung kuat sekolah umum dan telah menjadi anggota Dewan Pendidikan Darlam selama bertahu n-tahun. Pada saat itu, saya mampu pergi ke sekolah swasta, tetapi ketika saya berada di kelas empat, saya memindahkan saya ke sekolah dasar umum lebih banyak sekolah kepala. Sekolah itu berada di daerah yang cukup kasar, dan tidak ada teman atau ana k-anak yang tumbuh di sana. Setelah sekolah, saya sepertinya melakukan kekerasan setiap hari dan berpikir saya harus bena r-benar kembali ke Calvart. Solusi ibu saya adalah menyewa pensiunan petinju profesional dan mengajarinya cara melindungi dirinya sendiri. Ibu saya mengembalikan saya ke hutan dan lulus dari sekolah dasar di sana. Di sana, saya bisa membuat teman yang sangat baik dengan karier yang menarik yang akan sepenuhnya diabaikan jika ditinggalkan di sekolah swasta. Pada saat itu, saya tidak tahu persis mengapa ibu saya menempatkan saya dalam situasi ini, tetapi itu jelas merupakan bagian dari rencana ibu saya. Mungkin ibu saya ingin saya belajar bagaimana menghadapi pengganggu dalam hidup saya nanti.
Saya juga diberkati dengan tindakan ibu saya dan memiliki kesempatan yang tidak biasa untuk belajar tentang politik sejak dini. Pada saat itu, sebelum email dan komunikasi e-mail masih tersedia, Kongres Negara Bagian North Carolina mengandalkan pageboys untuk bertukar dokumen antara Senat dan Dewan Perwakilan Rakyat. Posisi halaman ini biasanya ditugaskan untuk siswa sekolah dasar. Mungkin karena kami kecil dan kami dapat dengan mudah memanjat di antara kursi di kursi. Posisi halaman tampaknya sangat berguna, tetapi alasannya tidak dipahami dengan baik pada saat itu. Senator lokal Claude Curry adalah hubungan yang ramah keluarga, dan sepupu ini, William B. Yumsted, menjadi gubernur North Carolina ketika saya berada di kelas enam. Selama sesi legislatif tahun ini, saya pergi ke Lauri dengan bus di jalan setapak setiap pagi, atau saya naik mobil Senator Curry dan menuju ke tempat legislatif. Dan di malam hari dan akhir pekan, saya harus mengikuti studi sekolah hari itu. Pada saat itu, saya tidak merasa banyak manfaat pada kesempatan ini, tetapi dia mengajari saya cara belajar sendiri dan mengecualikan politisi sebagai profesi masa depan. Setelah sekolah dasar, saya pergi ke sekolah menengah pertama mobil di pusat kota Dalam.
Saya tidak memiliki nilai bagus di sekolah menengah pertama, tetapi saya tidak peduli dengan orang tua saya, dan jika saya bena r-benar ingin memasuki Universitas Duke, saya akan segera membutuhkan pendidikan yang lebih baik daripada menghadiri sekolah umum di Dalrum. Jadi saya memutuskan untuk pergi ke sekolah persiapan militer bernama McCalie School di Catanuga, Tennessee selama tiga tahun. Sekolah McCary memiliki program yang sangat baik dalam matematika, kimia, dan fisika, dan ada disiplin yang parah, jadi saya sangat membutuhkan pada tahap itu. Dia menghabiskan tiga tahun di tim sepak bola dan tim gulat dan lulus dalam kondisi fisiknya. Selama liburan musim panas, ia bekerja di lokasi konstruksi sebagai pekerja fisik. Saya tinggal di rumah orang tua saya karena saya lelah di malam hari dan tidak bisa melakukan apa pun. Ini kemudian menjadi penting ketika saya menikah dengan orang tercinta.
Pada musim panas 1959, saya memasuki Universitas Duke sebagai sekolah kedokteran pada siswa persiapan. Saya memasuki program tiga tahun, tetapi dalam program ini saya memiliki lebih banyak kursus dan saya dapat lulus sebelumnya dengan berpartisipasi di sekolah musim panas. Saya memilih kimia sebagai jurusan karena saya membutuhkan beberapa mata pelajaran dalam kimia untuk memasuki sekolah kedokteran. Saya memilih matematika sebagai jurusan tambahan karena saya pikir matematika di McCalie sangat menyenangkan dan memiliki lebih sedikit waktu belajar. Saya bahkan tidak tahu keberadaan sains kristal, tetapi itu adalah kurikulum yang cukup bagus untuk mendapatkan pekerjaan. Saya pikir itu beruntung dari bijaksana.
Apa yang bena r-benar beruntung adalah bahwa saya bertemu pertunjukan Bebe Brad pada hari pertama orientasi siswa yang baru. Dia diperkenalkan oleh seorang teman McCalie, dan temannya berasal dari Winston Serrum, North Carolina, kota kelahiran bebe. Ayahnya adalah pendiri dan ketua kursus bedah di Bowman Gray Medical University di Winston Serrum. Dia dan Dr. Brad Show berkenalan karena ayah saya adalah seorang profesor ahli bedah di Duke University. Mengingat latar belakang kami yang sama, tidak mengherankan bahwa kami dibagikan dan dibagikan banyak pandangan dunia yang sama. Dia adalah orang yang paling indah, cerdas dan hangat yang pernah saya temui. Selama dua tahun terakhir di Duke University, kami tidak dapat dipisahkan. Dia adalah belahan jiwa saya, dan karena saya baru saja memasuki Universitas Duke, itu adalah dukungan dan kekuatan pendorong penting dalam hidup dan karier saya. Berkat anggota pendiri Cabang Duke Asosiasi Persahabatan Kappa Alpha saat belajar di University of Duke, kami menikmati kehidupan sosial yang indah di Duke University. Ketika kakek saya terdaftar di Duke University, itu akan menjadi organisasi yang serius dan ketat, tetapi ketika saya terdaftar, itu adalah rumah hewan di Universitas Universitas Duke. Kegiatan akhir pekan mereka terkenal, dan melihat saudar a-saudara Asosiasi Persahabatan KA pada Sabtu malam, semua orang akan membayangkan bahwa semua orang pada akhirnya akan menjadi tunawisma. Bahkan, kebanyakan dari mereka memiliki karier yang cemerlang di berbagai bidang. Salah satunya bena r-benar beruntung bahwa ia bertemu Beve Blood Show pada hari pertama orientasi siswa yang baru. Dia diperkenalkan oleh seorang teman McCalie, dan temannya berasal dari Winston Serrum, North Carolina, kota kelahiran Bebe. Ayahnya adalah pendiri dan ketua kursus bedah di Bowman Gray Medical University di Winston Serrum. Dia dan Dr. Brad Show berkenalan karena ayah saya adalah seorang profesor ahli bedah di Duke University. Mengingat latar belakang kami yang sama, tidak mengherankan bahwa kami dibagikan dan dibagikan banyak pandangan dunia yang sama. Dia adalah orang yang paling indah, cerdas dan hangat yang pernah saya temui. Selama dua tahun terakhir di Duke University, kami tidak dapat dipisahkan. Dia adalah belahan jiwa saya, dan karena saya baru saja memasuki Universitas Duke, itu adalah dukungan dan kekuatan pendorong penting dalam hidup dan karier saya. Berkat anggota pendiri Cabang Duke Asosiasi Persahabatan Kappa Alpha saat belajar di University of Duke, kami menikmati kehidupan sosial yang indah di Duke University. Ketika kakek saya terdaftar di Duke University, itu akan menjadi organisasi yang serius dan ketat, tetapi ketika saya terdaftar, itu adalah rumah hewan di Universitas Universitas Duke. Kegiatan akhir pekan mereka terkenal, dan melihat saudar a-saudara Asosiasi Persahabatan KA pada Sabtu malam, semua orang akan membayangkan bahwa semua orang pada akhirnya akan menjadi tunawisma. Bahkan, kebanyakan dari mereka memiliki karier yang cemerlang di berbagai bidang. Salah satunya bena r-benar beruntung bertemu Bebe Blood Show pada hari pertama orientasi siswa yang baru. Dia diperkenalkan oleh seorang teman McCalie, dan temannya berasal dari Winston Serrum, North Carolina, kota kelahiran bebe. Ayahnya adalah pendiri dan ketua kursus bedah di Bowman Gray Medical University di Winston Serrum. Dia dan Dr. Brad Show berkenalan karena ayah saya adalah seorang profesor ahli bedah di Duke University. Mengingat latar belakang kami yang sama, tidak mengherankan bahwa kami dibagikan dan dibagikan banyak pandangan dunia yang sama. Dia adalah orang yang paling indah, cerdas dan hangat yang pernah saya temui. Selama dua tahun terakhir di Duke University, kami tidak dapat dipisahkan. Dia adalah belahan jiwa saya, dan karena saya baru saja memasuki Universitas Duke, itu adalah dukungan dan kekuatan pendorong penting dalam hidup dan karier saya. Berkat anggota pendiri Cabang Duke Asosiasi Persahabatan Kappa Alpha saat belajar di University of Duke, kami menikmati kehidupan sosial yang indah di Duke University. Ketika kakek saya terdaftar di Duke University, itu akan menjadi organisasi yang serius dan ketat, tetapi ketika saya terdaftar, itu adalah rumah hewan di Universitas Universitas Duke. Kegiatan akhir pekan mereka terkenal, dan melihat saudar a-saudara Asosiasi Persahabatan KA pada Sabtu malam, semua orang akan membayangkan bahwa semua orang pada akhirnya akan menjadi tunawisma. Bahkan, kebanyakan dari mereka memiliki karier yang cemerlang di berbagai bidang. Salah satunya
Itu menyenangkan dan kacau pada akhir pekan, tetapi Bee dan saya, pada hari kerja, saya berkonsentrasi untuk belajar di asrama yang tenang di kampus wanita (untungnya itu berbeda dari asrama pria), dan belajar di Universitas Duke. lulus dalam kondisi yang cukup bagus. Ibunya menentang masa muda kita, tetapi memutuskan untuk menikah pada saat yang sama ketika dia lulus, dan Bebe telah mempercepat kurikulum pendidikan anak usia dini sehingga dia bisa lulus di tengah kelas empatnya. Pada tahun 1962, kami menikah dengan Natal 21 tahun dan mendapat gelar sarjana di Duke University. Saya tidak bisa membayangkan hidup tanpa dia. Jika kami tidak beruntung bertemu dengan siswa baru di Universitas Universitas Duke, saya mungkin telah bekerja di industri konstruksi.
Tujuan saya menjadi ahli bedah ortopedi saat belajar di Duke University secara bertahap menggantikan sains. Saya sangat menyukai kimia dan matematika, tetapi anatomi dan biologi tampaknya diminta untuk menghafal dengan kekuatan, jadi saya tidak bisa menikmatinya. Dalam dunia biologi molekuler saat ini, biologi mungkin akan lebih menarik, tetapi pada tahun 1959, pelajaran biologi yang diperlukan untuk sekolah kedokteran tidak begitu menarik. Terima kasih kepada profesor yang luar biasa dari Marcus Hobbus, saya terbangun oleh chemistry fisik. Ketika saya masih setahun, saya mempertimbangkan kembali untuk pergi ke sekolah kedokteran. Anehnya, saya sangat dianjurkan oleh ayah saya dan ayah Bebe untuk mengejar karier sains. Kimia fisik adalah bidang pembelajaran favorit saya, jadi saya mengandalkan Hobbus bahwa saya akan membimbing saya ke arah yang saya pikir adalah yang terbaik untuk saya. Dia memiliki sahabatnya di Profesor Kimia Universitas Rice di Houston, Texas. Setelah berbicara dengan mereka, dia yakin bahwa program pascasarjana adalah yang terbaik bagi saya. Pada waktu itu, Kenneth Pizzer, yang baru saja ditunjuk sebagai presiden Universitas Rice, adalah seorang dokter terkenal yang baru saja datang dari Berkelley, dan pengaruhnya luar biasa di departemen kimia. Robert Carl, yang merupakan salah satu kolega dekat di Berkelley School, yang memenangkan Hadiah Nobel dalam bidang Bahan Kimia kemudian untuk penemuan Bucky Ball.
Pada musim semi 1962, ketika saya lulus dari University of Duke, saya beruntung menemukan pekerjaan liburan musim panas di North Carolina Research Triangle Park yang baru saja didirikan. Salah satu penghuni awal di taman adalah Chemstand Research Institute, salah satu Monsant Corporation. Chemstand adalah kategori polimer sintetis utama Monsanto, terutama program penelitian yang fokus pada penemuan dan pengembangan serat polimer baru. Penelitian polimer sintetis adalah bidang panas di awal 196 0-an (apakah Anda ingat bahwa dalam film “Wisuda”, Anda ingat bahwa Dustin Hoffman adalah jalan utama menuju kesuksesan adalah plastik). bidang. Saya mensintesis dan menguji berbagai turunan nilon musim panas ini. Batch baru yang disintesis diputar menjadi serat. Saya dapat melakukan kegiatan lain karena saya punya banyak waktu dalam prosesnya. Saya tidak mengambil bahasa Rusia, Prancis, atau Jerman saat belajar di University of Duke, dan saya tahu bahwa saya perlu meloloskan kedua bahasa ini sebagai bagian dari kurikulum doktoral di Rice University. Akibatnya, kami dapat melihat penelitian perusahaan secara kasar, belajar tentang polimer, lulus ujian bahasa asing yang diperlukan, dan meningkatkan tabungan kami.
Saya tiba di Rice pada musim gugur 1962 dan memutuskan untuk segera melakukan penelitian kelulusan kimia fisik. Untungnya, saya dapat menerimanya sebagai siswa di laboratorium Ronalds. Sus adalah seorang profesor muda dan dinamis yang mengejar berbagai program penelitian dalam kristalologi. Sus adalah pilihan yang sangat beruntung, terutama dalam karirnya, terutama dalam pendidikan. Sus juga mensurvei struktur zat sem i-konduktif organik dengan bantuan penelitian dari NASA. Dengan subsidi penelitian Dr. Sus, saya dapat berkonsentrasi pada penelitian penuh waktu sebagai peneliti. SUS memperoleh sampel kristal senyawa carbanion yang disebut Pirizinium Disia nometiride, terutama di confom atom karbon pusat. Ato m-atom kecil yang ringan ini akan menjadi beasiswa kristal sepele di zaman modern, tetapi pada tahun 1963 sulit untuk menentukan struktur kristal sederhana seperti itu. Lipatan otomatis belum mudah diperoleh, dan sebagian besar struktur masih ditentukan menggunakan teknologi film yang membosankan. Saya segera menjadi ahli di Visenberg, dan saya membuat ribuan tempat film yang menemui tangan dengan membandingkan tempat difraksi yang terbuat dari strip film standar secara terpisah. Pada saat itu, perhitungan adalah tantangan besar, tetapi itu beruntung.
Saat belajar di Rice, Bebe dan saya tinggal di sebuah apartemen beberapa blok dari kampus. Bebe segera mengajar siswa kelas empat di sekolah dasar baru di pinggiran Houston. Pada waktu itu, Houston tumbuh dengan cepat, dan dia bertanggung jawab atas 62 siswa di kelas satu. Sebagian besar ana k-anak hanya bisa berbicara bahasa Spanyol, jadi dia harus menggunakan siswa lain untuk diterjemahkan. Banyak mahasiswa pascasarjana lainnya di apartemen tempat kami tinggal, adalah guru di sekolah dasar dalam situasi keras yang sama, jadi kami dan tema n-teman kami bena r-benar terpesona pada akhir pekan. Karena saya mewarisi semua formula dan peralatan untuk menyeduh dari ahli kimia organik yang lulus, saya beralih dari masih mengemudi ke bir. Kami membuka pesta setiap akhir pekan dengan bir buatan sendiri dan popcorn. Ketiganya adalah pemburu bebek yang bersemangat, dan pada awal 196 0-an, kampus beras, yang berada di pinggiran Houston, diisi dengan unggas air dengan burung air. Selama musim bebek, kami pergi untuk berburu bebek dan geng bersama di pagi hari Rabu dan berbagi freezer besar yang penuh mangsa. Ibu Bebe menasihati saya bahwa dia akan kelaparan ketika dia menikah, jadi dia senang membuktikan bahwa itu adalah kesalahan. Salah satu teman berburu bebek mendedikasikan gelar Ph. D. Saya tidak berpikir instrukturnya mengenal Morgan.
Pada tahap ini, saya tidak tahu persis apa yang ingin saya lakukan dalam sisa hidup saya. Saya bena r-benar mempertimbangkan kembali tentang pergi ke sekolah kedokteran dan berkonsultasi dengan ayah dan ayah say a-i n-Law. Ayahnya memiliki persahabatan dengan Presiden Universitas Duke Philip Handler, ketua Universitas Duke, dan telah mengatur untuk bertemu Dr. Handler dan mendiskusikan pilihan kariernya. Ini adalah pertemuan yang sangat penting bagi saya. Dr. Handler, seorang anggota terkemuka dari American Science Academy, memiliki pengetahuan yang menawan dan orang yang persuasif, dan menunjukkan pendapat bahwa kristalologi memberi saya peluang besar di bidang biologi. Dia mengklaim bahwa pergi ke sekolah kedokteran akan membuan g-buang waktu yang berharga dalam karirnya. Dia memberi tahu saya tentang Negar a-dari Penelitia n-Tart dalam Kristal Biologis dan merekomendasikan saya untuk menjadi salah satu kelompok utama yang belajar di bidang ini. Dia menjelaskan bahwa kelompok kristal terkemuka AS di bidang ilmu kristal biologis berada di MIT dan California Institute of Technology, dan mendorong salah satu kelompok untuk melanjutkan pelatihan kristalologi. Dengan bantuan Dr. Suspension, laboratorium Dick Marsh dan Bob Corie dari California Institute of Technology memiliki posisi sebagai peneliti doktoral, dan saya bergabung dengan mereka pada musim semi 1965.
Saya sangat beruntung bisa memasuki California Institute of Technology. Kelompok kristal terletak di Departemen Biologi, dan penelitian yang menarik di bidang baru yang disebut biologi molekuler tampaknya berkembang di laboratorium apa pun. Seiring dengan lingkungan biologi yang kaya ini, pelatihan kristal saya telah maju ke tingkat yang sama sekali baru di bawah bimbingan Dick Marsh. Dick adalah orang yang terkenal, mulai mengumpulkan data difraksi yang akurat, dan merangsang akurasi tinggi dalam semua aspek penelitian struktural kristal, dari penulisan akhir naskah yang sesuai yang menggambarkan analisis dan hasil. Saya ingin berpikir bahwa banyak dari obsesinya, yang mencoba melakukan segalanya dengan sempurna mungkin, telah ditransmisikan kepada saya saat mereka bersamanya, dan sampai batas tertentu untuk memberi tahu para siswa dan postdoc. Saat berencana untuk melewatkan prosedur eksperimental dan hasil kristalologis dalam analisis dan pelaporan yang sesuai, Anda akan segera mengingat Dick dan merasa bersalah.
Dengan pengawasan dan dorongan Dick yang keras, saya memutuskan untuk menentukan kembali struktur kristal paranitrofenyldetide kalium tak lama setelah tiba di California Institute of Technology. Ini adalah pelajaran yang luar biasa untuk memberi tahu Anda cara melanjutkan dengan gaya Dick Marsh, dan saya dapat dengan cepat membenamkan diri di pengumpulan data dan fasilitas komputer Institute California Institute. Peralatan komputer Cartec terutama negar a-dar i-t, dan ada staf pendukung di bingkai utama IBM terbaik dan pusat kalkulator skala besar yang membantu masalah sehar i-hari. Segera, saya tenggelam dalam akuisisi Fortran, bahasa umum dunia dalam perhitungan ilmiah tahun 196 0-an. Pada saat itu, tidak ada yang sesuai dengan aplikasi terbaru yang secara otomatis dapat menjalankan sebagian besar fungsi perhitungan, dan banyak program komputer yang diperlukan untuk prosedur kristalisasi sehar i-hari masih sedang dikembangkan. Jika Anda ingin melakukan sesuatu yang aneh, kami harus menulis perangkat lunak. Fakta bahwa California Institute of Technology telah menyentuh komputer lebih awal adalah kesempatan yang bagus untuk mendapatkan pengalaman pengembangan perangkat lunak, dan akhirnya meluncurkan kelompok kristalnya sendiri.
Setelah membuktikan bahwa mereka adalah kecukupan terhadap prosedur kristalisasi yang sesuai, saya siap untuk memulai tujuan awal biologi struktural. Mengikuti klik Watson, yang menemukan struktur doubl e-liner dari DNA, berbagai minat dalam pengembangan struktur asa m-tingkat asam nukleat dari asam nukleat dan mengembangkan model asam nukleat yang lebih tepat dikumpulkan. Untungnya, saya bisa mendapatkan kristal asam warga negara, salah satu dari empat komponen RNA, dan analisis struktur kristal nukleotida ini menjadi proyek besar pertama saya di California Institute of Technology. Ini adalah awal dari beberapa tahun pembawa dalam penelitian kristalologi antara komponen asam nukleat dan kesamaannya.
Setelah satu tahun di California Institute of Technology, saya tidak yakin apa yang ingin saya lakukan dalam sisa hidup saya. Beras dan belajar dan meneliti di Institut Teknologi Rice dan California, dan tinggal di perusahaan yang dihabiskan dalam penelitian, Triangle Park selama liburan musim panas, dipenuhi dalam semua aspek. 196 0-an luar biasa untuk terlibat dalam sains, dan ada banyak peluang karier. Saya diwawancarai oleh beberapa perusahaan kimia, tetapi saya sangat senang dengan program penelitian luas Dupon. Saya akhirnya mendapatkan pekerjaan dalam kategori serat polimer di sebuah lembaga penelitian di Kinston, North Carolina. Karena Kinston ada di dekat saya dan keluarga Bebe, dalam waktu satu jam ke rumah Bug Beach di sepanjang pantai. Juga, dari pengalaman telah terlibat dalam serat polimer di Chemstand, saya merasa sedikit mengerti apa yang bisa saya lakukan di Dupon.
Kelebihan langsung dan tak terduga memilih Dupon segera lahir setelah saya bergabung dengan perusahaan. Pada tahun 1965, Perang Vietnam pecah, dan saya dipersingkat menjadi perekrutan tak lama setelah tiba di Dupon. Saya lulus ujian fisik dengan cemerlang dan berada di jalan menuju tentara, tetapi direktur Kinston Research Institute melakukan intervensi di komite wajib militer. Akibatnya, Dupon telah menandatangani kontrak dengan Angkatan Darat dalam pengembangan serat sintetis yang digunakan dalam parasut dan sumbe r-sumber lainnya, dan saya dianggap sebagai salah satu sumber daya manusia yang sangat diperlukan untuk membuat kontrak. Saya merasa bersalah karena teman dekat saya tidak dapat mengikuti perang, tetapi saya lega jujur ketika wajib militer ditunda. Saya pikir itu mungkin akan menjadi rahmat sementara, tetapi setelah itu, komite wajib militer tidak menghubungi saya.
Sejauh yang saya tahu, saya tidak terlibat langsung dalam penelitian parasut, tetapi saya sangat terjebak dalam beberapa program penelitian baru di DuPont. Saya tidak dipekerjakan sebagai sarjana kristal, tetapi sebagian besar penelitian awal di Dupon adalah tes yang bisa berguna untuk tipe baru karakteristik serat dan itu bisa berguna. Institut Penelitian Kinston memiliki perangkat difraksi x-ray, terutama digunakan untuk menerapkan aplikasi paten berdasarkan karakteristik kristalisasi serat, domain kristal, dan arah kristal. Itu juga memiliki komputer bingkai utama IBM dan terutama digunakan dalam aplikasi bisnis. Mungkin bukan cara direktur lembaga penelitian menginginkan waktu yang saya inginkan, tetapi pada akhirnya, saya memutuskan untuk menggunakan data yang dikonversi tekstil untuk menentukan struktur kristal polimer unik yang dikembangkan oleh grup saya. Saya mengirimkan makalah tentang struktur ini pada tahun 1966 untuk pembacaan manajemen, tetapi belum menyetujui posting disertasi. Namun, saya menggunakan poliester baru ini (kain seperti kasmir sintetis) untuk membuat dua tes untuk pengujian. Mungkin saya tidak bisa melakukan itu, tetapi saya mengambilnya ketika saya berhenti Dupon dan mengenakan bebek dalam cuaca beku selama bertahu n-tahun. Sejauh yang saya tahu, polimer ini tidak muncul di pasar.
Ada banyak kolega yang baik di Dupon, gaji itu cukup besar, dan perusahaan itu dengan murah hati diakui mengejar penelitian dasar yang tidak sejalan dengan pengembangan polimer baru, dan secara geografis secara geografis. Namun, dalam waktu kurang dari enam bulan, jelas bahwa perusahaan besar dan perusahaa n-perusahaan luar biasa seperti Dupon bukan sisanya. Kebebasan dan stimulus akademisi sangat cinta. Setelah bekerja selama beberapa bulan di Dupon, saya mengajukan aplikasi dokter ke NIH untuk terus mempelajari komponen asam nukleat. Saya terpaksa memutuskan ke mana harus pergi untuk melanjutkan penelitian postdok saya. Saya telah memutuskan untuk bergabung dengan lab Alex Rich di Massachusetts Institute of Technology, dan saya yakin bahwa saya dapat kembali ke Cartec. Bebe dan saya pergi ke Boston pada pertengahan 1966 dan mengunjungi kelompo k-kelompok penelitian yang kaya. Pada waktu itu, dua kaki ditumpuk, dan saya terkejut dengan harga perumahan Cambridge. Selain itu, tidak ada yang muncul di lab kristal, bahkan di muka. Sekarang saya mengerti bahwa zona waktu yang berbeda adalah prosedur standar kelompok, tetapi saya kecewa. Segera setelah menghubungi Dick Marsh, ia bersedia setuju dan kembali ke labnya di California, sinar matahari yang kuat.
Tahun kedua di California Institute of Technology adalah salah satu waktu yang paling memuaskan dalam hidup saya. Dia telah melihat dunia yang cukup untuk mengetahui bahwa kristal di dunia akademis adalah tempatnya, dan memiliki pengalaman ilmiah yang cukup untuk melompat ke penelitian yang bermakna terlebih dahulu. Yang sangat beruntung adalah bahwa ia dapat membangun persahabatan yang erat dengan postdoc Jerman yang luar biasa dari kelompok kristalisasi, Wolf Tewalt. Dengan antusiasme dan bimbingan Dick Marsh, Wolf dan saya telah memulai beberapa penelitian kristalologi tentang komponen asam nukleat yang belum dianalisis, dan telah memutuskan untuk menentukan struktur guanin, inosin, dan guanosin [6, 13, 14]. Di zaman modern, penelitian kristalologis seperti itu dapat dilakukan setiap hari menggunakan metode langsung perbedaan fase, tetapi pada tahun 1967, senyawa atom ringan seperti itu, terutama yang berpusat pada kiral. Namun, itu adalah cara yang bagus untuk belajar lebih banyak tentang kristalisasi, terutama kelompok California Institute of Technology memiliki bakat besar untuk bimbingan. Selain bantuan konstan dari Dick Marsh, ia belajar banyak tentang prosedur pengumpulan data sirkuler terbaru di bawah bimbingan stainless Sanson. Ternyata ini kemudian sangat penting ketika saya meluncurkan program studi kristal saya di tempat baru.
Sebelumnya pada tahun 1968, saya mulai mewawancarai seorang guru universitas. Pada awalnya, kimia berfokus pada departemen kimia karena kimia paling kompatibel dengan karier saya. Untungnya, pada waktu itu banyak universitas yang sangat baik telah memasuki studi kristal, dan banyak guru truk tenurial diposting di seluruh negeri. Dari tahun 196 0-an hingga 197 0-an, departemen sains universitas tumbuh pesat, dan biaya penelitian meningkat lebih cepat daripada hari ini. Itu adalah saat yang tepat untuk menemukan seorang profesor dalam kristalisasi, dan saya telah mewawancarai fakultas bahan kimia teratas dan telah mendiskusikan beberapa kali, tetapi suatu hari tib a-tiba kesempatan langka masuk. University of Alabama (UAB) telah memperoleh subsidi NIH skala besar untuk mendirikan laboratorium gigi interdisipliner di Birmingham, kedokteran gigi kelas atas di Amerika Serikat. Fokus subsidi adalah mempekerjakan para ilmuwan top di bidang ilmiah dasar bekerja sama dengan Fakultas Kedokteran dan Fakultas Departemen Gigi. Dalam formulir aplikasi subsidi, mereka menyarankan untuk mempekerjakan para kristalisasi dan mendapatkan banyak uang yang tersedia untuk mendukung posisi ini. Namun, dia tahu bahwa California Institute of Technology memiliki pemungutan suara Linus yang terkenal. Pada awal 1968, saya mulai diwawancarai oleh seorang guru universitas. Pada awalnya, kimia berfokus pada departemen kimia karena kimia adalah yang paling kompatibel dengan karier saya. Untungnya, pada waktu itu banyak universitas yang sangat baik telah memasuki studi kristal, dan banyak guru truk tenurial diposting di seluruh negeri. Dari tahun 196 0-an hingga 197 0-an, departemen sains universitas tumbuh pesat, dan biaya penelitian meningkat lebih cepat daripada hari ini. Itu adalah saat yang tepat untuk menemukan seorang profesor dalam kristalisasi, dan saya telah mewawancarai fakultas bahan kimia teratas dan telah mendiskusikan beberapa kali, tetapi suatu hari tib a-tiba kesempatan langka masuk. University of Alabama (UAB) telah memperoleh subsidi NIH skala besar untuk mendirikan laboratorium gigi interdisipliner di Birmingham, kedokteran gigi kelas atas di Amerika Serikat. Fokus dari subsidi adalah mempekerjakan para ilmuwan top di bidang ilmiah dasar bekerja sama dengan Fakultas Kedokteran dan Fakultas Departemen Gigi. Dalam formulir aplikasi subsidi, mereka menyarankan untuk mempekerjakan para kristalisasi dan mendapatkan banyak uang yang tersedia untuk mendukung posisi ini. Namun, dia tahu bahwa California Institute of Technology memiliki pemungutan suara Linus yang terkenal. Sebelumnya pada tahun 1968, saya mulai mewawancarai seorang guru universitas. Pada awalnya, kimia berfokus pada departemen kimia karena kimia adalah yang paling kompatibel dengan karier saya. Untungnya, pada waktu itu banyak universitas yang sangat baik telah memasuki studi kristal, dan banyak guru truk tenurial diposting di seluruh negeri. Dari tahun 196 0-an hingga 197 0-an, departemen sains universitas tumbuh pesat, dan biaya penelitian meningkat lebih cepat daripada hari ini. Itu adalah saat yang tepat untuk menemukan seorang profesor dalam kristalisasi, dan saya telah mewawancarai fakultas bahan kimia teratas dan telah mendiskusikan beberapa kali, tetapi suatu hari tib a-tiba kesempatan langka masuk. University of Alabama (UAB) telah memperoleh subsidi NIH skala besar untuk mendirikan laboratorium gigi interdisipliner di Birmingham, kedokteran gigi kelas atas di Amerika Serikat. Fokus subsidi adalah mempekerjakan para ilmuwan top di bidang ilmiah dasar bekerja sama dengan Fakultas Kedokteran dan Fakultas Departemen Gigi. Dalam formulir aplikasi subsidi, mereka menyarankan untuk mempekerjakan para kristalisasi dan mendapatkan banyak uang yang tersedia untuk mendukung posisi ini. Namun, dia tahu bahwa California Institute of Technology memiliki pemungutan suara Linus yang terkenal. laut
Setelah berdiskusi dengan Komite Investigasi, saya segera mengatur kunjungan ke Birmingham, di mana saya senang menjadi anggota profesor. Selain itu, ayah say a-i n-Law tahu bahwa Dr. John Kirin, salah satu ahli bedah kardiovaskular paling terkemuka di Amerika Serikat, bar u-baru ini bergeser dari Mayo ke ketua bedah Birmingham. Ayah say a-dalam bahasa telah mendengar banyak desa s-desus tentang pertumbuhan di Birmingham, jadi saya sangat mendorong saya untuk menanggapi kesempatan ini dengan serius. Setelah memecahkan ruang di laboratorium dan masalah pendanaan modal dalam program kristalisasi, saya melakukan sebagai asisten profesor di kelas biokimia, seorang peneliti di Dental Institute, dan seorang peneliti di Institute of Molecular Biology. Bebe dan saya pindah ke Birmingham pada musim semi 1968 dengan anak pertama (Genie) dan Wy Maraner (Dixie) yang lahir di Pasaddina.
Tujuan jangka panjang saya adalah untuk mengembangkan penelitian struktural kristal dan mencakup analog dari berbagai nukleosida, nukleotida, leotida oligonik, puding, pirimidin, dan komponen asam nukleat. Beberapa struktur kristal ditentukan di bidang ini, tetapi masih merupakan daerah yang tidak terputus. Banyak fitur struktural terperinci yang diperlukan untuk membangun model asam nukleat yang bermakna dan memahami berbagai peran biologis belum ditentukan. Tunjukkan bahwa banyak kesamaan komponen asam nukleat disintesis dan memiliki nilai terapi yang penting, tetapi untuk memahami mekanisme yang akurat yang mengubah karakteristik biologis asam nukleat. Setelah berdiskusi dengan Komite Investigasi
Saya akan segera memulai kristalologi dengan Birmingham, tetapi sudah beberapa bulan untuk merombak laboratorium, memasang perangkat difraksi x-ray yang penting, menguji dan menggunakannya. Periode suspensi adalah kesempatan penting untuk menganalisis struktur kristal yang ditentukan secara menyeluruh dan memperdalam pertanyaan struktural yang penting untuk dikerjakan. Beberapa kelompok penelitian lain yang berfokus pada menganalisis karakteristik komponen asam nukleat, tetapi pola interaksi antara puding dan pirimidine tampaknya tidak terlalu dipahami. Pola ikatan hidrogen umumnya dipahami, dan pengetahuan ini memainkan peran sentral dalam penemuan struktur DNA yang dikelilingi ganda oleh Watson Click. Fitur luar biasa dari struktur kristal guanin, inosin, dan guanosine, yang telah kami putuskan di California Institute of Technology adalah penumpukan ring puding datar yang erat, dan penumpukan pasangan dasar DNA yang berdekatan adalah penting. umumnya dipahami bahwa itu adalah efek stabilisasi. Namun, keakuratan interaksi spesifik, yang tampaknya penting dalam memahami efek stabilisasi ini, dan bagaimana interaksi ini berubah dengan memasukkan tubuh seperti basis atau senyawa interkalasi ke dalam DNA.
Dengan bantuan Joe Thomas yang cerdas, yang baru saja lulus dari sekolah menengah untuk belajar fisika di University of Michigan, saya memiliki turunan puding dan pirimidine di semua struktur kristal yang tersedia pada saat itu. Analisis kami pada akhirnya terintegrasi dengan Sundalingham M. (Sunda) Sundalingham dari Case Western Reserve University dan studi serupa oleh reka n-rekannya. Sebagai hasil dari analisis, kami dapat lebih memahami interaksi yang berkontribusi terhadap pola laminasi yang ditemukan dalam struktur kristal asam nukleat, puding, dan turunan pirimidin. Analisis ini juga merupakan titik awal yang berguna untuk memilih penelitian kristal yang bermakna di masa depan untuk lebih memahami kekuatan spesifik yang mengontrol interaksi penumpukan basis.
Ketika Crystal Science Labs, termasuk Picker Single Crystal Circular, yang diotomatisasi pada komputer PDP-8i Corporation Digital Corporation, bekerja, saya siap untuk memulai karir kristal di UAB. Ulf Thewalt, seorang kolega di California Institute of Technology, telah ditambahkan untuk melanjutkan penelitian bersama kristalologis yang dimulai di Passadina. Kelompok kristal kami melakukan berbagai penelitian struktural tentang turunan puding, turunan pirimidine, dan molekul menarik biologis lainnya [7, 12, 12, 15, 16, 20, 24, 32, 47]. Selain itu, kami telah mulai memproduksi penelitian tentang kompleks kalsium dan fosfat [27, 56] dan senyawa [8, 18] untuk lebih memahami kimia struktural fosfor [8, 18], dan reka n-rekan yang senang di bidang gigi saya melakukannya . Laboratorium saya telah menerima subsidi NIH, yang mendirikan laboratorium gigi, dan secara fisik berlokasi di ruang laboratorium, tetapi tekanannya adalah bekerja pada proyek yang terkait dengan kedokteran gigi. Faktanya, lembaga ini memiliki ilmuwan dasar yang sangat baik di garis depan yang tidak ada hubungannya dengan penelitian gigi klasik, seperti biokimia, biologi molekuler, dan biologi sel. Namun, saya segera menemukan bahwa saya terlibat dalam penelitian kedokteran gigi bahwa saya hampir tidak dapat memahami kimia struktural kalsium dan fosfat dan berbagai interaksi.
Selain Wolf, ia juga bisa berkolaborasi dengan Mani Subramanian, seorang kolega di California University of Technology. Selama beberapa tahun pertama di Birmingham, komponen asam nukleat [26, 37, 58, 85, 92], analog puding dan pirimidine [30, 35, 46, 49, 52, 52, 55, 57, 57, 61-63, 78, 84] Ini adalah perjalanan yang luar biasa dari studi kristal molekul rendah, dengan fokus pada struktur baru, kalsium dan kompleks asam fosfat [17, 22, 23, 28, 29, 33, 33, 34, 36, 38, 40, 41 , 44, 48, 53, 59, 69, 69, 69, 73, 77, 77, 82, 97, 104, 43], struktur biologis yang menarik dari molekul kecil lainnya [11, 31, 39, 45, 60, 70, 71, 75, 79, 83, 86]. Penelitian struktural ini berkontribusi pada dasa r-dasar pemahaman interaksi antara puding alami, puding modifikasi, pirimidine, dan interaksi antara ion kalsium dan ion fosfat dan berbagai ligan biologis dalam sistem mentah. Stud i-studi kristal ini di Bermingham juga telah memperluas pemahaman mereka tentang bagaimana puding dan pirimidine analog perubahan konformasi dan interaksi asam nukleat. Selain persahabatan dan kerja sama yang berkelanjutan antara Wolf dan Mani, penelitian kami saat ini, selain Bill Cook, J.
Pada tahun 1971, Pusat Kanker UAB ditetapkan sebagai salah satu pusat kanker umum pertama oleh National Institute of Cancer. Subsidi dari NCI, yang merupakan sumber pendanaan di Pusat Kanker Komprehensif, didukung untuk memperluas studi kristal kami. Ketika saya melamar NCI untuk menyediakan dana ke pusat kanker yang komprehensif, saya mendapat bantuan penelitian dari NCI untuk mendukung penelitian struktural tentang puding dan analog pirimidine. Selain itu, dana untuk membangun fasilitas inti kristal X-Ray di Pusat Kanker telah diperoleh, dan telah menjadi mungkin untuk mendukung penelitian struktural bersama dengan anggota pusat kanker lainnya. Subsidi ini telah memungkinkan pekerjaan tambahan dari peneliti postDOC yang telah memperluas fasilitas komputer di Crystal Science Group, mengembangkan peralatan grafis komputer, dan dilatih dalam biologi struktural. Juga, subsidi ini membayar sejumlah besar gaji saya, jadi saya dapat menghabiskan lebih banyak waktu untuk studi kristal dan pelatihan mahasiswa pascasarjana.
Ada beberapa kolega di Institut Gigi dan Pusat Kanker Umum dengan program penelitian untuk tujuan isolasi dan analisis karakteristik protein penting, tetapi mereka selalu melakukan penelitian bersama pada penelitian struktural protein. Jelas bahwa memperluas program kami di bidang kristalisasi protein yang berkembang pesat akan melihat sejumlah cara baru yang menarik. Pada waktu itu, kami memiliki penelitian yang sangat diperkaya dengan John Mongomery, direktur Fakultas Bahan Kimia Organik, di Southern Research Institute (SRI) terdekat. John Montgomery juga melakukan penelitian bersama di Pusat Kanker di Institut kami. Dia terkenal di bidang tumor, dan beberapa oba t-obatan yang dikembangkan di labnya berhasil dalam pengobatan pasien kanker. Di antara banyak pencapaian, John adalah anggota Komite Penasihat Kanker Presiden Nixon (Nixon menyatakan perang melawan kanker, yang merupakan alasan mengapa pendanaan penelitian kanker meningkat) dan diidentifikasi dalam penelitian kanker. . Dalam kariernya yang luar biasa, John mencoba merancang sebuah senyawa yang menghambat target enzim tumor, tanpa mengetahui struktur bagian target enzim. Dia selalu mendesak saya untuk memfokuskan penelitian kristal pada beberapa target protein penting pada kanker. John juga memperkenalkan saya untuk menyambut farmasi George Hitchings dan Gato Rudo Elion.
UAB memiliki sistem yang memungkinkan guru untuk memilih mavatatif guru setiap tujuh tahun, dan saya memutuskan untuk mengambil kesempatan ini untuk mempelajari esensi kristalisasi protein. Universitas Oxford memiliki program kristalisasi protein terbesar pada saat itu di bawah c o-genggun Dorothy Hodgkin dan David Philips. Dalam sebuah studi kolaboratif dengan kelompok kristal protein dan perusahaan farmasi yang disambut (perusahaan induk dari Welcome Welcome AS), ia merancang dan mengembangkan senyawa yang mengatur aktivitas humanhemoglobin. Saya meminta Profesor David Philips untuk menghabiskan satu tahun dari 1974 hingga 1975 di Philips. Reka n-rekan yang menyambut balir sangat ingin belajar di luar negeri, dan selama periode cuti panjang di Oxford, hibah untuk mempelajari struktur enzim reduksi asam folat dubble, target penemuan obat utama dari program kimia medis mereka disediakan.
Pada musim semi 1974, Bebe membawa tiga anak kecil ke Oxford dari balows menyambut dengan 100 mg enzim reduksi asam folat kolonelik yang dimurnikan. Universitas memberi kami tempat tinggal di dekat kampus, dan dengan bantuan reka n-rekan Oxford, ana k-anak dapat dengan cepat memasuki sekolah swasta yang indah. Laboratorium Oxford berada di sebelah Dorothy Hodgkin, yang memenangkan Hadiah Nobel dalam penisilin dan vitamin B pada tahun 1964.12Dia beralih ke protein dan mempelajari struktur insulin. Dorothy, yang secara mengejutkan hangat, dengan cepat berkenalan dan merasa nyaman. Kelompok Dorothy adalah lingkungan terbaik bagi saya untuk memulai karier baru ini, karena ada beberapa rekan lain yang bertujuan untuk berubah menjadi protein.
Gambar 1: Bebe (kanan) dan Margaret Adams di pantai villa di Inggris di kolam renang Inggris. Hari itu adalah hari yang cerah yang jarang hangat. Banyak Bathers melepas pakaian mereka, dan ana k-anak serangga bersemangat.
Kelompok kristal Joe Craut dari San Diego telah mengumumkan bahwa struktur kristal enzim telah diputuskan. Untungnya, Universitas Oxford memiliki beberapa proyek analisis struktural kristal protein menarik lainnya yang sedang berlangsung, jadi saya segera saya 6-fosfogurcon dehydrogenase (Margaret Adams, Gambar 1). Margaret masih dalam tahap awal menentukan struktur kristal ini dan dengan penuh semangat mengundang saya ke proyek ini. Dia adalah guru yang luar biasa dan menghabiskan banyak waktu tentang detail studi kristal protein. Margaret juga memberi saya manfaat seumur hidup ketika ia memperkenalkan John Heliwell, seorang mahasiswa pascasarjana yang cerdas yang sedang mengerjakan proyek kristal ini. Karena John berada di tahap awal penelitian di sekolah pascasarjana, kami berada pada tingkat yang hampir sama dalam pelatihan kristal protein, dan kami dapat sepenuhnya berbagi pengalaman belajar kami. Kami menjadi teman dekat dan melanjutkan penelitian bersama selama bertahu n-tahun setelah meninggalkan Oxford. Saya menghabiskan waktu yang bahagia untuk mempelajari sebanyak mungkin hal tentang bidang baru ini, berpikir bahwa Margaret dan John akan sedikit membantu Anda. Tahun di Oxford sangat memuaskan terima kasih kepada Margaret dan John.
Segera setelah saya kembali dari Oxford, subsidi Pusat Kanker UAB dijadwalkan. Jadi saya memiliki peluang besar untuk memperluas subsidi, yang diperlukan untuk memperluas program kami secara efektif dalam kristalisasi protein. Saya kembali ke Birmingham selama sekitar dua minggu di pertengahan tahun untuk menulis proposal untuk pembaruan vacalitas skor inti kristal x-ray. Dalam pembaruan subsidi, ia mempekerjakan guru lain yang memiliki pengalaman dalam kristalisasi polimer, dan mengusulkan untuk membeli peralatan pengumpulan data dan peralatan pemodelan komputer yang diperlukan untuk penelitian struktural protein. Dia terdaftar di MIT Alex Rich Group selama beberapa tahun dan hanya memainkan peran utama dalam keputusan struktur kristal T-RNA. Buruk sangat terlibat dalam pengembangan laboratorium yang kaya untuk proyek kristalisasi jenis ini, dan memiliki latar belakang yang sangat baik dalam dasa r-dasar perhitungan kristalisasi dan kristalisasi polimer. Bud juga dari bagian selatan, dan dia telah menyelesaikan kursus sarjana di Georgia Institute of Technology, jadi dia dengan cepat menjadi akrab dengan pindah ke Birmingham dan bekerja keras. Kami berhasil meminta dana dari NCI untuk memperluas peralatan di laboratorium untuk analisis struktur kristal protein.
Kami memiliki beberapa target protein berbeda yang ingin kami kejar di UAB, dan telah memulai beberapa upaya untuk memurnikan dan mengkristal protein ini untuk penelitian struktural. Struktur protein pertama yang kami selesaikan adalah neurotomi kalajengking (Gbr. 2) [72, 90, 93-95, 98, 100, 111, 131, 157]. Kami telah memulai penelitian bersama yang produktif dengan Dean Wat, University of Clayton, untuk mempelajari protein yang sangat menarik, diisolasi dari Arizona Scorpion Poison. Dean mencurahkan karirnya untuk isolasi dan penentuan karakteristik kalajengking ini, yang bertindak dan bertindak pada saluran natrium sel saraf, untuk memahami bagaimana racun menyesuaikan impuls saraf. Dean datang ke Birmingham dan menghabiskan satu tahun untuk pemurnian dan kristalisasi protei n-protein ini, yang dipisahkan dari racun kalajengking yang disediakan oleh seorang kolega di Arizona State University. Arizona Scorpion Poison mengandung lebih dari 20 jenis racun yang menargetkan berbagai hewan, burung, dan saluran natrium serangga, dan memahami perbedaan saluran natrium dalam berbagai spesies. Struktur racun pertama yang telah kami selesaikan adalah upaya peneliti dokter yang sangat baik Bob Almatic, yang bergabung dari California University of Technology, dan mahasiswa pascasarjana Juan Fonteshyja Camps, yang bekerja erat dengan Bob. Hasil Struktural < Pan> Kami memiliki beberapa target protein yang berbeda untuk mengejar UAB, dan telah memulai beberapa upaya untuk memurnikan dan mengkristalisasi protein ini untuk penelitian struktural. Struktur protein pertama yang kami selesaikan adalah neurotomi kalajengking (Gbr. 2) [72, 90, 93-95, 98, 100, 111, 131, 157]. Kami telah memulai penelitian bersama yang produktif dengan Dean Wat, University of Clayton, untuk mempelajari protein yang sangat menarik, diisolasi dari Arizona Scorpion Poison. Dean mencurahkan karirnya untuk isolasi dan penentuan karakteristik kalajengking ini, yang bertindak dan bertindak pada saluran natrium sel saraf, untuk memahami bagaimana racun menyesuaikan impuls saraf. Dean datang ke Birmingham dan menghabiskan satu tahun untuk pemurnian dan kristalisasi protei n-protein ini, yang dipisahkan dari racun kalajengking yang disediakan oleh seorang kolega di Arizona State University. Arizona Scorpion Poison mengandung lebih dari 20 jenis racun yang menargetkan berbagai hewan, burung, dan saluran natrium serangga, dan memahami perbedaan saluran natrium dalam berbagai spesies. Struktur racun pertama yang telah kami selesaikan adalah upaya peneliti dokter yang sangat baik Bob Almatic, yang bergabung dari California University of Technology, dan mahasiswa pascasarjana Juan Fonteshyja Camps, yang bekerja erat dengan Bob. Sebagai hasil struktural, kami memiliki beberapa target protein yang berbeda yang ingin kami kejar di UAB, dan telah memulai beberapa upaya untuk memurnikan dan mengkristalisasi protein ini untuk penelitian struktural. Struktur protein pertama yang kami selesaikan adalah neurotomi kalajengking (Gbr. 2) [72, 90, 93-95, 98, 100, 111, 131, 157]. Kami telah memulai penelitian bersama yang produktif dengan Dean Wat, University of Clayton, untuk mempelajari protein yang sangat menarik, diisolasi dari Arizona Scorpion Poison. Dean mencurahkan karirnya untuk isolasi dan penentuan karakteristik kalajengking ini, yang bertindak dan bertindak pada saluran natrium sel saraf, untuk memahami bagaimana racun menyesuaikan impuls saraf. Dean datang ke Birmingham dan menghabiskan satu tahun untuk pemurnian dan kristalisasi protei n-protein ini, yang dipisahkan dari racun kalajengking yang disediakan oleh seorang kolega di Arizona State University. Arizona Scorpion Poison mengandung lebih dari 20 jenis racun yang menargetkan berbagai hewan, burung, dan saluran natrium serangga, dan memahami perbedaan saluran natrium dalam berbagai spesies. Struktur pertama racun yang kami selesaikan adalah upaya Juan Fonteshy Camps, seorang mahasiswa pascasarjana, Juan Fonteshyja Camps, yang telah bekerja sama erat dengan Bob Almacy, yang bergabung dengan Institut Teknologi California. Hasil Struktural
138], bakteri pinstreoside holase [109], transpherin serum manusia [68], enzim reduksi aldosa babi [148]. Proyek kristalisasi protein di Birmingham adalah awal dalam program kami, Bud Suddath, Bill Cook, Larry DeLucas, Howard Einspahr, Juan Fontecilla-Camps. Semua kristal ini telah mengumpulkan karier luar biasa di bidang kristal dan biologi molekuler di UAB, lembaga akademik terkemuka lainnya, dan di industri. Selain itu, pada awal studi kristal protein, kami telah menerima manfaat besar dari beberapa tahun penelitian bersama dengan sutradara WAT, yang menambahkan kemampuan yang penting untuk biokimia dan pemurnian protein ke kelompok kami.
Gambar 2: Bill Cook sebagai ahli patologi klinis. Bangunan itu adalah seorang kristalis yang berbakat dan memainkan peran penting sebagai anggota tim manajemen Bio Crystal.
Tak lama setelah kembali dari Sabatikal di Oxford, John Montgomery dan saya telah meluncurkan proses memilih target yang tepat untuk mengejar desain obat berbasis struktural yang dipimpin oleh kristal protein. Faktanya, ini adalah tujuan utama untuk memperkuat proposal subsidi pembaruan NCI untuk dukungan pusat kanker, dan ada banyak pasar protein yang diketahui yang cocok untuk pendekatan ini. Baik John dan saya memiliki pengalaman yang cukup besar tentang turunan puding dan pirimidine, beberapa di antaranya termasuk kemoterapi yang berguna dalam tumor, jadi kami adalah enzim pertama yang terlibat dalam metabolisme puding dan pirimidine. Akhirnya, kami memilih enzim manusia prinunculeoside holase (PNP), yang bisa menjadi target ideal dari desain obat. PNP telah terbukti penting untuk reaksi kekebalan normal, dan tidak memiliki kekebalan se l-T untuk ana k-anak dengan kerusakan pada gen PNP. Inhibitor PNP mungkin berguna secara klinis untuk pengobatan penyakit melalui se l-T, termasuk berbagai penyakit autoimun, leukemia se l-T, dan limfoma sel T. Selain itu, jika PNP dihambat, sintesis biologis guanosin dari guanosin dapat dihambat, dan dapat digunakan untuk menghambat sintesis asam urat untuk pengobatan gout. Melalui studi kristal, dan desain, sintesis, dan pengembangan inhibitor akhir, kami tahu itu akan menjadi cara yang panjang dan sulit. Oleh karena itu, sangat menggembirakan untuk mendapatkan target berikut.
Gambar 3: Struktur kristal protein ditentukan untuk pertama kalinya di Vermingham. Diperkirakan bahwa asam amino yang disorot berwarna kuning adalah residu hidrofobik dan membentuk situs bersama saluran natrium film. Tak lama setelah kembali dari Sabatikal di Oxford, John Montgomery dan saya telah meluncurkan proses memilih target yang tepat untuk mengejar desain obat berbasis struktural yang dipimpin oleh kristal protein. Faktanya, ini adalah tujuan utama untuk memperkuat proposal subsidi pembaruan NCI untuk dukungan pusat kanker, dan ada banyak pasar protein yang diketahui yang cocok untuk pendekatan ini. Baik John dan saya memiliki pengalaman yang cukup besar tentang turunan puding dan pirimidine, beberapa di antaranya termasuk kemoterapi yang berguna dalam tumor, jadi kami adalah enzim pertama yang terlibat dalam metabolisme puding dan pirimidine. Akhirnya, kami memilih enzim manusia prinunculeoside holase (PNP), yang bisa menjadi target ideal dari desain obat. PNP telah terbukti penting untuk reaksi kekebalan normal, dan tidak memiliki kekebalan se l-T untuk ana k-anak dengan kerusakan pada gen PNP. Inhibitor PNP mungkin berguna secara klinis untuk pengobatan penyakit melalui se l-T, termasuk berbagai penyakit autoimun, leukemia se l-T, dan limfoma sel T. Selain itu, jika PNP dihambat, sintesis biologis guanosin dari guanosin dapat dihambat, dan dapat digunakan untuk menghambat sintesis asam urat untuk pengobatan gout. Melalui studi kristal, dan desain, sintesis, dan pengembangan inhibitor akhir, kami tahu itu akan menjadi cara yang panjang dan sulit. Oleh karena itu, sangat menggembirakan untuk mendapatkan target berikut.
Gambar 3: Struktur kristal protein ditentukan untuk pertama kalinya di Vermingham. Diperkirakan bahwa asam amino yang disorot berwarna kuning adalah residu hidrofobik dan membentuk situs bersama saluran natrium film. Tak lama setelah kembali dari Sabatikal di Oxford, John Montgomery dan saya telah meluncurkan proses memilih target yang tepat untuk mengejar desain obat berbasis struktural yang dipimpin oleh kristal protein. Faktanya, ini adalah tujuan utama untuk memperkuat proposal subsidi pembaruan NCI untuk dukungan pusat kanker, dan ada banyak pasar protein yang diketahui yang cocok untuk pendekatan ini. Baik John dan saya memiliki pengalaman yang cukup besar tentang turunan puding dan pirimidine, beberapa di antaranya termasuk kemoterapi yang berguna dalam tumor, jadi kami adalah enzim pertama yang terlibat dalam metabolisme puding dan pirimidine. Akhirnya, kami memilih enzim manusia prinunculeoside holase (PNP), yang bisa menjadi target ideal dari desain obat. PNP telah terbukti penting untuk reaksi kekebalan normal, dan tidak memiliki kekebalan se l-T untuk ana k-anak dengan kerusakan pada gen PNP. Inhibitor PNP mungkin berguna secara klinis untuk pengobatan penyakit melalui se l-T, termasuk berbagai penyakit autoimun, leukemia se l-T, dan limfoma sel T. Selain itu, jika PNP dihambat, sintesis biologis guanosin dari guanosin dapat dihambat, dan dapat digunakan untuk menghambat sintesis asam urat untuk pengobatan gout. Melalui studi kristal, dan desain, sintesis, dan pengembangan inhibitor akhir, kami tahu itu akan menjadi cara yang panjang dan sulit. Oleh karena itu, sangat menggembirakan untuk mendapatkan target berikut.
Gambar 3: Struktur kristal protein ditentukan untuk pertama kalinya di Vermingham. Diperkirakan bahwa asam amino yang disorot berwarna kuning adalah residu hidrofobik dan membentuk situs bersama saluran natrium film.
Gbr. 4: Peta padat puding dengan resolusi 6 Å dari pin leoside holase (PNP). Situs aktif enzim terletak di antarmuka antara monomer dan terletak di ujung saluran pelarut besar yang menembus kristal. Salura n-saluran ini hanya merendam kristal asli yang terbentuk dalam larutan yang mengandung inhibitor sehingga inhibitor dapat dengan mudah mengakses situs aktif.
Banyak penelitian biokimia tentang PNP manusia dilakukan oleh Bob Parks dan Johanna Stockers dari Fakultas Farmasi Universitas Brown. Mereka bersedia untuk bekerja sama dengan kami tentang penelitian enzim penelitian ilmiah kristal, dan memberikan dengan murah hati enzim yang halus dari sel darah merah manusia. Bill Cook (Gambar 3) enzim mengkristal di UAB pada tahun 1981 [91], dan Steve Erick (Steve Ealick) memainkan peran utama dalam penelitian kristal untuk akhirnya menentukan struktur enzim. Ini karena kandungan pelarut kristal sangat tinggi karena 80%(Gbr. 4) dan difraksi relatif lemah. Kemudian, ternyata konten pelarut yang sangat besar ini beruntung ketika mempersiapkan bagian aktif dari bagian aktif PNP untuk penelitian desain obat, tetapi kristal ini dapat digunakan dalam fasilitas optik radiasi. Kandidat untuk analisis menggunakan garis balok dengan kekuatan tinggi.
Pada tahun 1981, saya dapat mengambil liburan sabatikal lagi, kembali ke Oxford, dan membantu Margaret Adams dan kelompoknya untuk menyelesaikan analisis struktural dehidrogenase asam 6-fosfogurgon di hati domba dengan 2. 6å. Pada tahap ini, John Heliwell telah menyelesaikan program doktoralnya dan pindah ke Dallytbury, Inggris Utara, di mana salah satu fasilitas Synchrotron yang baru dibangun. John mengembangkan garis balok untuk studi kristal x-ray dan dengan senang hati berpartisipasi sebagai peneliti c o-research dalam penelitian struktural PNP. John telah bergabung dengan inisiatif dengan Trever Greenhau, seorang peneliti postdoc yang sangat baik dan antusias di fasilitas Synchrotron John. Steve E-Kid datang ke Darzbury melalui Oxford untuk bekerja sama dengan mengumpulkan data pembatalan resolusi tinggi, yang mengarah ke struktur resolusi tinggi PNP. Setelah itu, Trevers pindah ke Birmingham dan melanjutkan proyek ini, dan penelitian bersama John menentukan struktur PNP, menentukan struktur kompleks dengan substrat analog dan inhibitor enzim, dan menampilkan karakteristik substrat enzim. untuk mengungkapkan.
Dia adalah seorang postdoc, yang sedang mempelajari struktur kristal Hos Holase dengan Louise Johnson. Dia adalah seorang postdoc, mempelajari struktur kristal Hos Holase dengan Louise Johnson. Bab umumnya dianggap sebagai salah satu kristal terbaik dalam kelompok Oxford. Dia adalah salah satu dari sedikit peneliti yang dapat menggunakan sistem cliffix komputer Evans dan Suther Land yang baru untuk secara interaktif membangun penelusuran protein agar sesuai dengan peta kepadatan elektronik pada akhir pekan itu. Margaret dan muri d-muridnya berhasil menciptakan peta enzim solusi tinggi. Saya mendapat dana untuk mengatur perangkat grafis yang sama di Birmingham, jadi saya ingin belajar sebanyak mungkin tentang cara menggunakannya, dan ketika saya bisa menggunakannya untuk waktu yang lama di akhir pekan, saya melompat pada kesempatan apa pun. Sat u-satunya hal yang dapat digunakan selama ja m-jam seperti itu adalah dia selalu membantu saya dengan proyek saya. Akhirnya, kami memutuskan untuk memberikan posisi Baboo dalam kelompok kami di Birmingham, tetapi ia membantu kami bergabung dengan kami dan sedang mengerjakan penelitian kristal Steve E-Lick dan PNP.
Gambar 5: Teman saya yang lama dan bub rekan saya menggunakan struktur PNP untuk merancang potensi inhibitor enzim.
Steve E-Lick, dari 1981 hingga 1985, telah memimpin semua penelitian kristalisasi berganda pada PNP dan enzim. Dia menerima banyak dukungan dari anggota lain dari kelompok kristal Birmingham dan Crystal Studies Group di Birmingham, seperti Treva Greenhau, Dan Carter, Steve Rules, J. Havash, S. V. L. Bill Cook, John Heliwell, juga menerima nasihat terus menerus. Dia juga mendapat manfaat dari penelitian bersama yang berkelanjutan dengan kelompok biokimia di University of Brown, termasuk Bob Parks, Johanna Stoekler, dan S-F. Chen. Pada tahun 1985, saya merasa bahwa data struktural (Gambar 6 dan Gambar 7) perlu memulai inisiatif penuh untuk merancang dan mengembangkan inhibitor PNP yang berguna [112]. Proyek ini membutuhkan tugas skala yang cukup besar, termasuk ilmu kristal, pemodelan, kimia organik, biokimia, dan farmasi, dan mencapai tahap di mana inhibitor untuk pengembangan pr a-klinis dapat dirancang dengan tepat, disintesis, dan diuji. Anggaran yang diperlukan untuk proyek pertama sangat besar, meskipun kurangnya dana untuk pengembangan klinis. Proposal kami diyakinkan, tetapi anggaran ditentukan bahwa NIH melebihi tingkat pertimbangan pendanaan.
Gbr. 6: Lengkapi tiga struktur pnp tiga dimensi. Situs aktivitas enzim, yang merupakan target desain obat, ditampilkan sebagai area stapel di antarmuka antar monomer.
Gbr. (Lihat Gbr. 26).
Pada tahap ini, kami mulai serius mempertimbangkan penggalangan dana dari sektor swasta. Pada pertengahan tahun 1980an, bioteknologi menarik modal ventura dalam jumlah besar dan kami yakin bahwa proyek PNP mempunyai potensi komersial jangka panjang. Untungnya, ia mampu menarik perhatian Bill Spencer, seorang pemimpin bisnis terkemuka di Birmingham dan anggota Dewan Penasihat Rektor UAB. Bill telah memulai perusahaan bioteknologi pertamanya di Birmingham beberapa tahun yang lalu dan sangat antusias membantu kami meningkatkan modal ventura untuk memajukan proyek PNP kami. Dia memiliki koneksi investor yang baik di Tenggara, dan pada saat itu terdapat insentif pajak yang menjadikan jenis investasi ini sangat menguntungkan. Selain itu, UAB baru saja membuka inkubator startup dalam kampus, Pusat Kemajuan Industri Berkembang, dan sangat antusias menyambut kami sebagai perusahaan bioteknologi pertamanya. Setelah John dan saya melakukan banyak presentasi kepada investor yang memenuhi syarat, terutama di wilayah Birmingham, Bill mampu mengumpulkan $4, 5 juta dan meluncurkan usahanya. Prospektus yang dibagikan kepada calon investor tidak hanya menggambarkan proyek PNP tetapi juga menggambarkan rencana kami.
Di akhir pembiayaan, kami ditanya oleh Tom Glenn, manajer penelitian Chivagy Iggy Pharmaceuticals (kemudian dari Novartis), tentang kemungkinan penelitian bersama pada proyek PNP. Tom adalah direktur Fakultas Farmasi di Fakultas Kedokteran Universitas Alabama Selatan sebelum ia pindah ke Chibaaga Iggy, dan akrab dengan kegiatan penelitian kami di Birmingham. Tom juga ingin para ilmuwan mempelajari lebih lanjut tentang desain seret struktural, menyoroti potensi inhibitor PNP sebagai kandidat klinis untuk pengobatan penyakit autoimun. Cibaga Iggy setuju untuk berinvestasi di perusahaan baru kami dan melanjutkan proyek dengan para ilmuwan berpengalaman, Wayne Guida dan Mark Ellion. Wayne dan Mark telah memberi kami pengalaman, organisasi, dan disiplin di perusahaan farmasi untuk program kami, yang merupakan kekuatan yang sangat penting bagi tim desain obat PNP.
Bub menjadi karyawan pertama Biocryst dan menjadi salah satu karier saya dalam karier saya. BAB adalah ilmuwan yang sangat baik dengan karier yang hebat di bidang ilmu kristal protein, dan telah sepenuhnya akrab dengan kristalisasi dan struktur PNP karena ia telah bekerja sama dengan Steve Eulic selama beberapa tahun. Bub dengan cepat menjadi pusat Biocryst, dan ditemukan sebagai kekuatan pendorong bagi masa depan untuk merancang beberapa kandidat obat yang menarik dengan Biocryst selama bertahu n-tahun. Sesuai dengan bimbingan dari seorang kolega Chivagy Iggy, kami mendirikan tim desain drag yang terdiri dari Steve E-lick dan Bab, dan organik di Chivagy Iggy Wayne Guida dan Mark Ellion, dan Southern Research Institute (SRI) Sedikit dengan John Mongomery dan Jack Scrist, yang memimpin chemistry. Fasilitas sains dan pemodelan kristal dipasang di inkubator UAB, tetapi kimia organik disubkontrakkan oleh SRI, yang memiliki berbagai fasilitas eksperimental yang tidak perlu diduplikasi segera di inkubator. Saya adalah ketua Komite Penasihat Ilmiah untuk Biocryst, tetapi saya terutama terlibat dalam berbagai program kristalisasi di UAB. Saya terus menonton kegiatan tim desain obat, tetapi kristalisasi dan desain desain proyek PNP terutama disebabkan oleh kontribusi besar oran g-orang berikut:
Gbr. 8: Fot o-foto kristal trigglikin yang tumbuh di Bumi, terlihat menggunakan Shrielen Optical. Metode ini menekankan konveksi yang dipimpin kepadatan yang disebabkan oleh perubahan kepadatan karena penipisan larutan di dekat permukaan kristal yang tumbuh. Konvensi dianggap menghalangi pertumbuhan kristal yang ideal. (Disediakan oleh Marshall Astronaut).
Gbr. 9: Triglyclyci n-sulfate Crystal tumbuh di luar angkasa. Konveksi kerapatan destruktif seperti yang terlihat di bumi pada dasarnya dikecualikan di bawah gravitasi mikro. Akibatnya, proses pertumbuhan yang lebih seragam diperoleh, yang didominasi oleh penyebaran larutan dari larutan ke permukaan kristal yang tumbuh. (Disediakan oleh Marshall Astronaut)
Pada tahun 1985, program Studi Kristal UAB berubah secara universal ke luar angkasa. NASA berada di tenga h-tengah desain stasiun ruang angkasa, dan banyak tugas disesuaikan di Marshal Space Flight Center di Hanzbill, Alabama. Rencana Stasiun Luar Angkasa dipromosikan oleh momentum politik Kongres yang kuat. Kontrak konstruksi Stasiun Luar Angkasa yang direncanakan akan dibagi menjadi 50 negara bagian di Amerika Serikat. Akibatnya, Kongres, yang berpikir bahwa stasiun ruang angkasa akan digunakan secara ilmiah, memperoleh berbagai dukungan. NASA secara aktif bekerja untuk mengidentifikasi proyek sains prioritas tinggi yang dapat menggunakan fasilitas mahal ini dengan benar. Senator Alabama Howel Hefrins, anggota Senator, berasal dari Alabama utara dan merupakan pendukung utama dari Rencana Stasiun Luar Angkasa. Dia menghubungi Direktur Marshall Space Flight Center dan Presiden UAB, dan untuk bekerja sama dengan kedua organisasi untuk mengidentifikasi proye k-proyek kompetitif di Alabama untuk mendapatkan uang dari anggaran sains stasiun ruang angkasa. Sebagai anggota Komite UAB, saya bertemu dengan para ilmuwan Hanzville untuk mengkonfirmasi masalah umum. Karena kami tidak pernah memikirkan kemungkinan bahwa program studi kristal kami terkait dengan alam semesta. Namun, pada pertemuan itu, ia menerima presentasi tentang eksperimen pertumbuhan kristal yang dilakukan di ruang angkasa beberapa tahun yang lalu. Eksperimen ini memiliki pengukuran optik
Gambar 10: Foto Shrielen dari kristal tim Liza yang tumbuh di bumi. Ini menunjukkan bahwa konveksi yang dipimpin kepadatan terlihat pada jenis kristal lain terjadi pada kristal protein. Foto ini disediakan oleh Dr. Marc Pusey dari Astronot Marshall.
Saya memperkenalkan beberapa kegiatan yang berkaitan dengan ilmu kristal protein pada UAB dan untuk menumbuhkan kristal protein berkualitas tinggi untuk penelitian struktural, dan semua orang di bidang kami dihadapi. Ilmuwan NASA segera memahami bahwa pertumbuhan kristal protein adalah bidang yang sangat penting untuk percobaan di bawah gravitasi mikro dan program penelitian paralel yang didukung oleh NASA. Masalah penting yang berjuang dengan penelitian struktural kristal penting dalam biologi, bukti masa lalu tentang efek mikr o-gravitasi pada pertumbuhan kristal, dan kemungkinan iklan yang berlaku untuk desain obat berdasarkan struktur dalam industri farmasi. protein mengandung semua elemen yang mereka inginkan. Tidak jelas bagaimana efek bahan anorganik yang diamati oleh pertumbuhan mikr o-tumbuh terkait dengan pertumbuhan kristal polimer, tetapi kami memiliki persetujuan yang antusias karena itu adalah bidang untuk dipelajari.
Gambar 11: Slide favorit saya yang sering saya tunjukkan kepada NASA ketika menjelaskan mengapa komunitas kristal begitu tertarik pada pertumbuhan kristal protein.
Segera, Birmingham Crystal Group merancang eksperimen pertumbuhan kristal protein yang tepat yang dapat diimplementasikan pada pesawat ulan g-alik yang terbang dengan jadwal yang cukup teratur pada saat itu, bekerja sama dengan para ilmuwan dan insinyur dari Pusat Penerbangan Luar Angkasa Marshall. Kami merencanakan eksperimen biologis menggunakan sistem elektroforesis skala besar oleh McDonnell Douglas Eros Pace, yang menggunakan sistem renang listrik skala besar oleh McDonnell Douglas Eros Pace, menggunakan sistem renang listrik skala besar. ) mengetahui bahwa ia akan naik sebagai spesialis muatan untuk melakukan percobaan. Menjelaskan rencana kami kepada tim renang listrik, mereka sepakat untuk membawa perangkat pertumbuhan kristal protein pertama kami dan memiliki eksperimen Charlie Walker melakukan. Hanya ada beberapa bulan untuk percobaan dan desain peralatan untuk dengan cepat melihat pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro untuk pertama kalinya. Charlie Walker harus menyimpan perangkat pertumbuhan kristal di ruang terbatas perangkat renang listrik, dan tidak ada banyak waktu untuk membagi dalam percobaan kami, jadi percobaan pertama ini cukup sederhana.
Kami dengan cepat merancang perangkat difusi uap sederhana (Gambar 12) dengan ruang yang dapat berisi beberapa jenis protein dan dapat diaktifkan di ruang angkasa. Perangkat ini dibuat di pabrik lokal di bawah pengawasan ketat para insinyur NASA, dan eksperimen pertumbuhan kristal protein gayaberat mikro pertama kami dilakukan pada penerbangan ulang-alik STS-51D pada bulan April 1985. Difusi uap air dipilih sebagai metode pertama yang dipertimbangkan karena merupakan teknik kristalisasi protein yang paling banyak digunakan dan memungkinkan eksperimen dilakukan dengan sampel protein yang sangat kecil. Karena metode ini telah menjadi metode pilihan dalam kristalografi protein, sebagian besar data tentang kualitas kristal yang tumbuh di bumi diperoleh dengan menggunakan kristal yang tumbuh difusi uap, dan banyak protein Kondisi kristalisasi dikembangkan dengan baik untuk metode ini.
Gambar 12: Perangkat Difusi Uap Genggam (VDA Genggam) yang diterbangkan pada Pesawat Ulang-alik Penerbangan STS-51D. Perangkat ini memiliki 17 ruang, masing-masing berisi percobaan pertumbuhan kristal protein terpisah. Setiap ruang berisi bahan penyerap sumbu, ditunjukkan di sisi kanan ruang, yang dijenuhkan dengan larutan pengendap sebelum diluncurkan. Silinder putih yang menonjol dari sisi ruangan adalah jarum suntik, dioperasikan dengan kunci hex. Jarum suntik yang berisi larutan protein ada di sisi kiri ruangan. Alat suntik di sebelah kanan mengoperasikan pendorong yang menutup ujung alat suntik protein selama peluncuran dan pendaratan. Tetesan larutan protein dipaksa keluar dari semprit di sebelah kiri dan diseimbangkan dengan pengendap di dalam bilik. Sebelum mendarat, tetesan protein dimasukkan ke dalam semprit dan semprit ditutup rapat. Sebuah catatan ditempatkan pada perangkat untuk mengingatkan Charlie Walker tentang langkah-langkah yang harus diikuti.
Gambar 13: Detail ruang pertumbuhan kristal tunggal VDA. Plunger, yang menutup jarum suntik protein selama penembakan dan pendaratan, berada dalam posisi tersembunyi di bagian bawah ruangan. Ujung jarum suntik atas menunjukkan larutan protein yang diekstrusi, dengan kristal protein tumbuh di dalam tetesan.
Perangkat difusi uap secara resmi ditentukan sebagai VDA genggam oleh NASA, dan spesifikasi ini kemudian diperluas untuk memasukkan jenis yang lebih baik yang dikembangkan setelah penerbangan anta r-jemput pertama. VDA genggam awal memiliki beberapa rongga di pelat aluminium. Jarum suntik yang mengandung sampel larutan protein ditempatkan pada bagian rongga yang mengandung penyerap yang direndam dalam larutan sedimen. Di ujung rongga, ada plunger yang bisa dimasukkan dan keluar untuk memblokir dan membuka jarum suntik (Gbr. 13). Rongga pelat aluminium ditutupi dengan lembaran plastik transparan di kedua sisi pelat sehingga operasi dan pertumbuhan kristal dapat diamati dan difoto.
Gambar 14: Larry Delewukus adalah laboratorium yang ditugaskan kepada kami di Kennedy Space Center, yang sarat dengan VDA dalam persiapan untuk Shuttleflight STS-51D. Kami sangat meremehkan waktu yang diperlukan untuk menyelesaikan pemuatan sesuai dengan prosedur terperinci yang ditunjukkan oleh perwakilan NASA.
Gambar 15: SUDAS buruk (kanan) mengawasi pekerjaan pemuatan STS-51D. Tunas menginstruksikan rapat umum ke langka h-langkah prosedur yang kami tulis. Sekitar waktu ini, para pejabat NASA menghantam pintu dan memberi tahu mereka bahwa perangkat perlu dipasang di anta r-jemput segera. Dalam rencana tersebut, sampel harus dimuat sesegera mungkin, tetapi kami melakukannya terlalu banyak. Perangkat difusi
Larutan protein disiapkan di area pemotretan dan dimuat dalam jarum suntik sekaligus, sedekat mungkin dengan waktu peluncuran. Sebelum mentransfer perangkat ke anta r-jemput, penyerap terbenam dalam larutan sedimen. Kemudian, sistem ditutup, dan plunger ditempatkan untuk menutup ujung jarum suntik. Baik jarum suntik dan plunger segel dioperasikan dengan kunci pas heksagonal. Bad Sadas, Rally Delewukus, dan saya bertanggung jawab atas pekerjaan menempatkan protein ke dalam perangkat tepat sebelum meluncurkan anta r-jemput menggunakan laboratorium yang ditugaskan kepada kami di Johnson Space Center (Gbr. 14, 15). Kemudian, perangkat dibawa ke pesawat ulan g-alik dan dipasang di dinding loker loker yang ditugaskan ke Charlie Walker. Di trek (Gbr. 16), Charlie melepas perangkat, menggunakan kunci pas untuk menarik plunger dari jarum suntik, dan mendorong larutan protein ke ujung jarum suntik. Proses kristalisasi diluncurkan oleh keseimbangan uap antara sedimen dan cairan larutan protein. Setelah itu, tetesan dalam larutan protein dikembalikan ke jarum suntik bersama dengan kristal yang telah tumbuh di bawah gravitasi mikroskopis, jarum suntik ditutup oleh plunger dan dikembalikan ke bumi di ujung penerbangan anta r-jemput.
Gambar 16: Charlie Walker, spesialis muatan dari McDonnell Douglas, melakukan percobaan di STS-51D. Di sisi kiri Charlie adalah sistem renang listrik skala besar untuk memurnikan alislopoetin manusia, yang digunakan dengan menekan aliran termal di bawah gravitasi mikro, yang menghambat berenang listrik skala besar.
Gambar 17: Kristal tim Liza dikultur oleh STS-51D. Ujung jarum suntik berkobar. Ini adalah perubahan pada menit terakhir oleh Bud Sudath, yang prihatin dengan kemungkinan bahwa penurunan protein bisa menjadi tidak stabil selama operasi penentuan posisi orbit.
Dari sudut pandang, dapat dikatakan bahwa percobaan pertama ini adalah percobaan pembelajaran yang berharga atau kegagalan besar. Dari lusinan sampel, hanya satu protein, tim Reson, yang memperoleh kristal berkualitas tinggi (Gambar 17). Ada masalah besar dengan stabilitas tetesan cairan dalam larutan protein, dan sebagian besar cairan yang berceceran di dinding ruang mengkristal. Kami menyimpulkan bahwa gerakan abnormal peluncuran roket penentuan posisi pada penerbangan spesifik mungkin merupakan faktor dalam ketidakstabilan cairan, dan dalam penerbangan masa depan, chip suntik untuk meningkatkan stabilitas tetes cairan mengambang. itu perlu untuk mengubah desain. Faktanya, percobaan yang berhasil di STS-51D, yang menghasilkan kristal tim Liza besar, menggunakan jenis lain dari chip suntik tipe flare yang ditambahkan oleh Sadas buruk pada tahap akhir jika ada gerakan yang tidak terduga.
| Bagaimanapun, saya pikir saya dapat mempelajari apa yang saya butuhkan untuk merancang perangkat yang lebih baik untuk percobaan gravitasi kecil karena penyebaran uap di masa depan. Saya juga belajar banyak hal, seperti berinteraksi dengan NASA, peralatan yang dapat digunakan untuk persiapan sampel di lokasi peluncuran, dan prosedur yang harus dipatuhi untuk mengembangkan peralatan yang dapat menahan penggunaan anta r-jemput. Kami segera mulai meningkatkan VDA genggam untuk penerbangan pesawat ulan g-alik di masa depan. Di sisi lain, di komunitas kristal, ada banyak perdebatan apakah ini bena r-benar layak dikejar. Setelah percobaan pada STS-51D, Gina Colata menerbitkan sebuah makalah berjudul “The Great Crystal Cape” di majalah Science, dan telah membahas di antara para kristalisasi tentang pertumbuhan kristal protein di ruang angkasa. dengan kata yang memalukan. Itu tergantung pada sudut pandang | Namun, tema n-temannya di dalam NASA terus menjadi khusus tentang memindahkan program. Awalnya, itu adalah pesawat ulan g-alik, dan pada akhirnya, sebagai program eksperimental yang berharga yang dapat dikejar di stasiun luar angkasa, semua yang mereka inginkan untuk pertumbuhan kristal protein dikemas. Ilmu kristal protein secara ilmiah menarik dan diperkenalkan dengan cepat dalam program desain obat oleh perusahaan farmasi di seluruh dunia. Pertumbuhan kristal adalah masalah utama dalam studi kristal protein, dan apa pun yang dapat meningkatkan proses ini adalah penting. Akhirnya, ada teori yang masuk akal tentang alasan mengapa gravitasi mikro mempengaruhi proses pertumbuhan kristal, dan dalam percobaan gravitasi mikro paling awal tentang pertumbuhan kristal anorganik, data yang didukung teor i-teori ini diperoleh. Semua ini mudah dimengerti bagi manajer puncak di NASA dan untuk Komite Pendanaan Kongres. Pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro telah terakumulasi di sini sampai setidaknya akumulasi hasil eksperimen yang dapat disimpulkan bahwa upaya lebih lanjut bena r-benar boros. |
Saat bekerja sama dengan insinyur NASA, kami telah meningkatkan VDA genggam untuk memaksimalkan stabilitas solusi dan menggabungkan perubahan untuk mengontrol proses difusi uap. VDA genggam yang ditingkatkan terbang dua kali di pesawat ulan g-alik pada tahun 1985, dan setiap kali lebih baik ditingkatkan ke perangkat dan proses. Dalam penerbangan anta r-jemput lainnya pada tahun 1985, jadwal kru kami dikelola secara ketat oleh kegiatan yang telah direncanakan selama bertahu n-tahun, jadi kami tidak dapat menghabiskan banyak waktu dalam percobaan kami.
Gambar 18: Larry Delucas dan Bill Nelson, anggota Dewan Perwakilan Rakyat, dilatih dalam VDA genggam yang dipasang di KC-135 NASA (umumnya dikenal sebagai “Vomit Comet”).
Gambar 19: Perwakilan Bill Nelson, anggota Dewan Perwakilan Rakyat, melakukan eksperimen pertumbuhan kristal protein pada pesawat ulang-alik STS-61C penerbangan. Perwakilan Nelson melakukannya dengan baik dan menjadi penggemar kristalisasi protein seumur hidup.
Peluang nyata pertama kami untuk memiliki manusia yang berdedikasi dalam eksperimen kami datang pada STS-61C pada bulan Januari 1986. Seorang spesialis muatan bernama Anggota Kongres Bill Nelson dari Florida bertanggung jawab atas penerbangan tersebut. Anggota Kongres Nelson (sekarang Senator Nelson) duduk di salah satu komite DPR yang mengawasi NASA, dan sebagai bagian dari tanggung jawab pengawasannya, dia mengatur agar saya dapat berpartisipasi dalam penerbangan ulang-alik. Anggota Kongres Nelson dapat memilih eksperimen mana yang dapat dilakukan dalam misi tersebut. Dia dengan antusias memilih eksperimen pertumbuhan kristal protein kami karena relevansinya dengan kristalografi protein dan penelitian biomedis yang penting. Dia adalah orang yang hebat untuk diajak bekerja sama. Dia terbang bersama Larry DeLucas dengan pesawat KC-135 (lebih dikenal sebagai “komet muntahan”), yang digunakan NASA untuk menciptakan periode gravitasi rendah yang singkat dengan terbang dalam gerakan parabola (Gambar 18). . Dia juga menjalani beberapa sesi pelatihan panjang di Birmingham mengenai prototipe peralatan pertumbuhan kristal kami, menanyakan banyak pertanyaan mendetail dan mampu memahami sepenuhnya langkah-langkah yang diperlukan. Dia melakukan percobaan yang sukses pada pesawat ulang-alik yang diluncurkan pada 12 Januari 1986 (Gambar 19). Hasilnya lagi-lagi agak beragam, tetapi merupakan peningkatan yang signifikan dibandingkan percobaan pertama. Anggota Kongres Nelson menjadi pendukung utama kristalografi protein di Kongres, melakukan percobaan yang sukses pada pesawat ulang-alik yang diluncurkan pada 12 Januari 1986.
Eksperimen dengan Nelson dilakukan pada wajah anta r-jemput terakhir sebelum kecelakaan Challenger pada 28 Januari 1986. Saya belum bereksperimen dengan penantang. Setelah kecelakaan Challenger, program pesawat ulan g-alik telah menunggu di tanah sementara NASA membuat perubahan untuk meningkatkan keselamatan program. Selama waktu ini, kami bekerja sama dengan insinyur NASA dan menggabungkan perubahan untuk memanfaatkan semua penerbangan VDA keempat (dikenal sebagai VDA canggih di NASA). Ini memungkinkan untuk melakukan lebih banyak percobaan pada saat yang sama. Perangkat keras ini otomatis dan dapat dioperasikan dengan waktu dan pelatihan kru minimal. VDA canggih disimpan dalam unit kontrol suhu yang dirancang untuk menggantikan salah satu loker dek tengah dari pesawat ulan g-alik. VDA canggih (Gbr. 20) berisi 60 ruang pertumbuhan kristal, sangat meningkatkan kontrol kondisi pertumbuhan kristal dalam penerbangan mendatang. Dari kecelakaan Challenger hingga pensiun UAB, kami menggunakan VDA tingkat lanjut untuk melakukan delapan percobaan penerbangan anta r-jemput lagi.
Gambar 20: Spesialis Peyload Pinky Nelson, dilatih dalam VDA lanjutan yang diproduksi setelah kecelakaan Challenger, (bukan kerabat dengan Dewan Perwakilan Nelson). Sistem ini lebih otomatis, dan ekstensi uap disimpan dalam unit kontrol suhu khusus yang dirancang untuk menggantikan salah satu loker mi d-ck dari pesawat ulan g-alik. Pinky melakukan percobaan pertama menggunakan VDA canggih di Space Shuttle STS-26 yang diluncurkan pada 29 September 1988. Eksperimen
Segera setelah kami melakukan percobaan gravitasi kecil untuk pertama kalinya, NASA berfokus pada teknologi yang dapat mengambil manfaat dari akses ke alam semesta, dengan fokus pada teknologi komersial, terutama dalam teknologi komersial. Pusat Pengembangan Komersial Ruang (CCDS) ini pada akhirnya melintasi beberapa teknologi dan bidang ilmiah yang dapat meningkatkan potensi komersial alam semesta. Kami berpikir bahwa berbagai aplikasi pertumbuhan kristal protein dan ilmu kristal protein lebih dekat dengan tujuan mereka daripada di bidang lainnya. Pada saat itu, kami sangat terlibat dalam program desain obat berbasis struktural BIOCRYST, dan beberapa perusahaan farmasi yang sangat baik telah bekerja sama dalam percobaan pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Kami telah mengajukan permohonan subsidi pusat untuk mendukung berbagai program kristalisasi di Birmingham dan penelitian bersama dengan mitra komersial. Dengan aplikasi pertama, NASA memberikan dana yang murah hati, dan Dewan Negara Bagian Alabama telah menyetujui pembentukan studi kristal polimer baru (CMC). Saya adalah direktur pusat pertama, Bad Sadas adalah wakil direktur Ilmu Kristal X-Ray, dan Larry DeLucas adalah wakil direktur pertumbuhan kristal protein. Beberapa perusahaan farmasi yang melakukan penelitian bersama dengan kami telah menjadi pusat pusat. Dengan penunjukan pusat, kami dapat memperoleh kemandirian yang cukup besar.
Program gravitasi kecil mengumpulkan kolaborator yang sangat baik dari akademik, lembaga penelitian pemerintah, dan industri. Ketika saya meninggalkan UAB, pada tahun 1994, 23 universitas, 12 perusahaan farmasi, dan empat lembaga pemerintah mengumpulkan peneliti bersama internasional yang bekerja sama dalam eksperimen pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Salah satu penelitian bersama berharga yang dikembangkan dari eksperimen ruang angkasa awal adalah Scheling Prow Pharmaceutical Company (kemudian diakuisisi oleh Merck). Dr. T. L. Nagabushan, wakil presiden senior yang bertanggung jawab atas Scheling Prau, sangat terlibat dalam penelitian biokimia dan klinis interferon, faktor pertumbuhan protein, sitokin, dan limfacaine ia sangat antusias dengan penelitian struktural protein. Alpha Interferon adalah bahan kimia utama dari scheling prau, dan dalam proses pembuatannya menghasilkan sejumlah besar protein yang sangat murni untuk dijual. Akibatnya, ada kemungkinan bahwa percobaan mikr o-gravitasi dapat diperluas lebih dari penelitian difusi uap yang dirancang untuk mendukung sampel protein miligram. Mempertimbangkan bukti bahwa gravitasi mikro mempengaruhi urutan kristal, diperkirakan bahwa kristalisasi mikr o-gravitasi dapat memberikan rute untuk meningkatkan pemurnian skala besar produk biologis. Program gravitasi mikro ini mengumpulkan kolaborator yang sangat baik dari akademisi, lembaga penelitian pemerintah, dan industri. Ketika saya meninggalkan UAB, pada tahun 1994, 23 universitas, 12 perusahaan farmasi, dan empat lembaga pemerintah mengumpulkan peneliti bersama internasional yang bekerja sama dalam eksperimen pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Salah satu penelitian bersama berharga yang dikembangkan dari eksperimen ruang angkasa awal adalah Scheling Prow Pharmaceutical Company (kemudian diakuisisi oleh Merck). T. L. Nagabushan, wakil presiden senior yang bertanggung jawab atas Scheling Prau, sangat terlibat dalam penelitian biokimia dan klinis interferon, faktor pertumbuhan protein, sitokin, dan limfacaine ia sangat antusias dengan penelitian struktural protein. Alpha Interferon adalah bahan kimia utama dari scheling prau, dan dalam proses pembuatannya menghasilkan sejumlah besar protein yang sangat murni untuk dijual. Akibatnya, ada kemungkinan bahwa percobaan mikr o-gravitasi dapat diperluas lebih dari penelitian difusi uap yang dirancang untuk mendukung sampel protein miligram. Mempertimbangkan bukti bahwa gravitasi mikro mempengaruhi urutan kristal, diperkirakan bahwa kristalisasi mikr o-gravitasi dapat memberikan rute untuk meningkatkan pemurnian skala besar produk biologis. Program T Mikroskop mengumpulkan kolaborator yang sangat baik dari Academic, Government Research Institute, dan Industri. Ketika saya meninggalkan UAB, pada tahun 1994, 23 universitas, 12 perusahaan farmasi, dan empat lembaga pemerintah mengumpulkan peneliti bersama internasional yang bekerja sama dalam eksperimen pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Salah satu penelitian bersama berharga yang dikembangkan dari eksperimen ruang angkasa awal adalah Scheling Prow Pharmaceutical Company (kemudian diakuisisi oleh Merck). Dr. T. L. Nagabushan, wakil presiden senior yang bertanggung jawab atas Scheling Prau, sangat terlibat dalam penelitian biokimia dan klinis interferon, faktor pertumbuhan protein, sitokin, dan limfacaine ia sangat antusias dengan penelitian struktural protein. Alpha Interferon adalah bahan kimia utama dari scheling prau, dan dalam proses pembuatannya menghasilkan sejumlah besar protein yang sangat murni untuk dijual. Akibatnya, ada kemungkinan bahwa percobaan mikr o-gravitasi dapat diperluas lebih dari penelitian difusi uap yang dirancang untuk mendukung sampel protein miligram. Mempertimbangkan bukti bahwa gravitasi mikro mempengaruhi urutan kristal, diperkirakan bahwa kristalisasi mikr o-gravitasi dapat memberikan rute untuk meningkatkan pemurnian skala besar produk biologis. T
Bekerja sama dengan grup penembakan pla u-caugu, kami telah merancang perangkat untuk melakukan percobaan kristalisasi curah di bawah gravitasi mikro. Sistem yang akhirnya kami rancang adalah salah satu teknologi yang paling umum digunakan dalam produksi obat, menggunakan perubahan suhu. Ini juga merupakan cara yang cukup sederhana untuk meningkatkan eksperimen untuk merespons sampel besar. Dalam CMC, percobaan ini terkoordinasi di Marianna Long, dan bekerja sama erat dengan berbagai anggota kelompok kelompok Sheling Prow. Perubahan suhu mungkin ideal untuk mengoptimalkan efek gravitasi mikro. Ini karena ruang angkasa, bersama dengan konveksi pertumbuhan kristal normal dan sedimentasi kristal, pada dasarnya dikecualikan dari suhu. Sistem yang dirancang untuk percobaan kristalisasi curah ini terdiri dari tutup logam yang sangat sederhana dan akurat dengan tutup logam yang bersentuhan dengan pelat logam yang melakukan kontrol suhu yang akurat. Silinder diisi dengan larutan protein sebelum peluncuran, mempertahankan suhu di mana protein dilarutkan. Di trek, suhu larutan secara bertahap disesuaikan dengan mengubah suhu pelat logam yang bersentuhan dengan tutup logam silinder. Akibatnya, gradien suhu terjadi pada seluruh silinder, menghasilkan aliran yang tidak stabil karena konveksi di bumi, tetapi sangat stabil di bawah gravitasi mikro. Bekerja sama dengan suhu
Sistem kristal curah ini (dikenal sebagai protein crystalline facility (PCF) di NASA) adalah sampel insulin faddy, interferon alpha, dan insulin manusia dalam empat penerbangan anta r-jemput dari tahun 1991 hingga 1994. Diuji menggunakan. Hasilnya menjanjikan, dan kristal yang dihasilkan di bawah gravitasi mikro jauh lebih besar daripada kristal yang umumnya ditanam pada sistem ini di tanah. Selain itu, disarankan bahwa kristal manusi a-Inslin ditransmisikan dengan resolusi tinggi secara signifikan dan peningkatan urutan internal. Dari kristal yang diperoleh dalam eksperimen kristalisasi curah awal seperti itu, yang paling bai k-yang dikarakterisasi adalah Dave Smith dari Hauptman Woodward Medical Institute dan kristal dari kompleks Hitoin Slin yang diperoleh oleh reka n-rekannya. Kristal yang diperoleh dari percobaan mikr o-gravitasi mereka lebih besar dan secara signifikan lebih tinggi dari kristal yang tumbuh di bawah gravitasi normal. Kelompok penelitian Buffalo berhasil menggunakan enam kristal yang telah tumbuh di lingkungan mikr o-gravitasi ini untuk mengumpulkan data untuk menugaskan struktur kompleks insulin menjadi 1. 4å.
Pertumbuhan kristal protein akhirnya menjadi program utama NASA, dan NASA menyediakan beberapa kelompok akademik dan mempromosikan berbagai proyek untuk lebih memahami bidang penting ini di bumi. Program Penelitian Pertumbuhan Kristal Protein telah didirikan di Marshall Space Flight Center, dan kami akan memperluas program di Birmingham dan membantu banyak peneliti bersama dari universitas lain dan perusahaan farmasi untuk menyesuaikan eksperimen pertumbuhan kristal protein dalam gravitasi mikro . Rally Delcas telah menjadi pemimpin penting dalam mengoordinasikan kegiatan ruang angkasa di Birmingham, dan kami telah segera bereksperimen dengan sebagian besar penerbangan anta r-jemput. Di sisi lain, tuntutan waktu dari NASA menjadi semakin besar ketika rencana konstruksi stasiun luar angkasa mendapatkan momentum. Di NASA, stasiun kosmik dianggap sebagai program utama pertumbuhan kristal protein, dan peralatan untuk itu termasuk dalam semua rencana awal stasiun. Rencana sementara adalah bahwa dengan memasang perangkat difraksi X-ray di stasiun luar angkasa, karakteristik kristal segera dievaluasi, sehingga Anda dapat mengumpulkan kumpulan data lengkap tanpa menunggu kembali ke bumi. Pada akhirnya, saya adalah Ketua Departemen Bioteknologi Asosiasi Penelitian Luar Angkasa Universitas, Komite Komite Aplikasi Industri Lingkungan Gravitasi Kecil, dan Komite Aplikasi Luar Angkasa.
Sumber daya manusia utama yang terlibat dalam program ini dinilai dapat mengakses fasilitas NASA segera, mendapatkan izin tingkat tinggi dari pemerintah. Selain itu, fasilitas eksperimental didirikan di Kennedy Space Center untuk menyiapkan percobaan di dekat lokasi peluncuran. Kelompok penelitian astronot Marshall telah berkembang untuk memasukkan kristal protein dan pertumbuhan kristal protein. Di sisi lain, saya perlu fokus pada program analisis struktur kristal protein lain, penelitian struktur protein yang menarik, dan desain seret berdasarkan struktur yang merupakan penelitian bersama yang bermanfaat dengan BioClisto.
Untungnya, Rally Delucas sepenuhnya didedikasikan untuk program NASA kami dan dengan cepat menjadi sangat terlibat dalam menyesuaikan semua aspek program. Dia memiliki keterampilan ilmiah dan kepribadian, dengan lancar memproses berbagai masalah yang kita hadapi setiap hari dan mampu berinteraksi secara efektif dengan banyak kolega NASA. Dia mengawasi semua eksperimen ruang kami, mengawasi desain perangkat pertumbuhan kristal protein yang berkembang, melatih spesialis muatan yang melakukan eksperimen anta r-jemput, dan berinteraksi dengan manajer program di NASA.
Gambar 21: Plot Wilson yang religius adalah salah satu metode yang digunakan untuk membandingkan urutan kristal protein yang tumbuh dalam ruang dan kristal protein yang telah tumbuh di bumi. Plo t-plot ini telah digunakan secara historis untuk menskalakan set data difraksi protein dari turunan Shigehar a-Gear untuk memperbaiki efek gangguan yang sering disebabkan oleh ikatan kristal protein. Faktor Debye-Waller (B) adalah fungsi dari perpindahan dua square-rata-rata dua persegi dalam posisi atom dalam struktur kristal. Nilai B biasanya merupakan skala gerakan panas, tetapi juga dipengaruhi oleh gangguan molekuler dalam kristal. Kemiringan plot Wilson yang religius adalah skala yang menunjukkan perbedaan dalam urutan ketika membandingkan kumpulan data difraksi dari kristal yang berbeda.
Ketika eksperimen gayaberat mikro Pesawat Luar Angkasa berkembang melalui penerbangan berturut-turut, data terakumulasi yang mendukung teori bahwa kristal protein yang lebih teratur dapat tumbuh dalam kondisi gayaberat mikro. Data yang paling meyakinkan berasal dari analisis yang cermat terhadap intensitas difraksi sebagai fungsi sudut hamburan ketika membandingkan kristal yang tumbuh ulang-alik dengan sampel kontrol. Data yang menurut saya paling berguna dalam menilai tatanan kristal adalah data yang digunakan secara historis untuk menskalakan data intensitas yang diperoleh dari turunan atom berat kristal protein ke data yang diperoleh dari kristal protein asli pernah Efek gangguan serupa juga terlihat pada plot Wilson relatif (Gambar 22) yang membandingkan kristal yang tumbuh di Bumi dengan kristal yang tumbuh dalam gayaberat mikro, dengan kristal yang tumbuh dalam gayaberat mikro menunjukkan resolusi yang lebih tinggi menunjukkan bahwa kristal tersebut cenderung lebih tertata dengan data difraksi yang dapat diukur. 132]. Namun, perdebatan pun terjadi di komunitas kristalografi mengenai apakah upaya tersebut benar-benar layak dilakukan dan apakah dana yang diperlukan akan lebih baik digunakan untuk tujuan lain. Saya bersimpati dengan masalah pendanaan ini karena ada proyek lain yang didukung oleh NIH, namun kenyataannya pendanaan yang diberikan Kongres kepada NASA sampai batas tertentu tidak bergantung pada pendanaan yang dialokasikan ke NIH.
Pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikroskopis sangat menarik pada akhir 198 0-an, dan tertarik pada misi cinta ruang angkasa yang dijadwalkan pada tahun 1992 dan percobaan jangka panjang di stasiun ruang angkasa berikutnya. Space Love Mission mungkin merupakan peluang bagus pertama untuk naik seorang sarjana kristal yang berkualifikasi di pesawat ulan g-alik. Salah satu keuntungan dari semua komite NASA adalah mengambil waktu saya adalah posisi yang kuat yang secara efektif dapat mengklaim kerangka sains kristalisasi dalam misi cinta ruang angkasa yang direncanakan. Jika NASA setuju untuk menambahkan kristalisasi protein ke Ilmuwan dalam Misi Love Love, orang yang paling logis adalah Delucas Rally. Pada tahun 1991, rapat umum memutuskan untuk naik ke STS-50 sebagai spesialis muatan dan memulai pelatihan selama satu tahun. Misinya diluncurkan pada 25 Juni 1992 (Gbr. 23), dan sampai pesawat ulan g-alik kembali dengan keadaan reli dan kristal yang sempurna pada 9 Juli, kami telah menjadi yang terpanjang. percobaan.
Gambar 23: Rally Deliukas adalah eksperimen pertumbuhan kristal protein dengan Space Love STS-50. Ini adalah misi 15 hari, mencapai periode terpanjang tanpa gangguan pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro.
Sebelum saya meninggalkan program pertumbuhan protein mikro dan bergabung dengan Biocryst pada tahun 1994, kami bereksperimen dengan 16 penerbangan antar-jemput [114, 116-118, 122, 128, 130, 132, 133, 140, 142-147, 154, 159, 165 , 169]. Empat di antaranya diimplementasikan menggunakan versi awal (genggam VDA) dari perangkat eksperimental uap yang tersebar. Lainnya dilakukan dengan menggunakan perangkat difusi uap canggih (VDA canggih) dan batch crystallypes (PCF) yang dikembangkan setelah penantang. Di antara penerbangan setelah penantang, percobaan kristalisasi skala besar dilakukan selama delapan kali, dan empat kali dalam empat kali, percobaan kristalisasi skala besar menggunakan perangkat pertumbuhan kristal lereng termal. Dalam 16 penerbangan anta r-jemput ini, total 81 jenis protein yang disediakan oleh sekitar 40 peneliti bersama dari kelompok kristal protein di seluruh dunia digunakan untuk percobaan pertumbuhan kristal. Dari jumlah tersebut, kurang dari 20 % kristal yang ditanam di lingkungan gravitasi kecil telah secara signifikan ditingkatkan daripada kristal yang diperoleh di tanah.
Kristalisasi di tanah sangat tidak dapat dihindari, dengan harapan bahwa banyak dari eksperimen difusi uap ini mungkin memiliki kesempatan untuk mendapatkan kristal yang berguna dari protein, yang sulit dalam kristalisasi di tanah. Eksperimen pertumbuhan kristal protein “langka” yang hampir gagal di alam semesta. Konsekuensi yang paling menjanjikan adalah eksperimen spasial protein yang telah berhasil dalam kristalisasi di Bumi dan telah dipelajari dalam jangkauan yang luas. [132] Dalam subset protein ini, urutan kristal ditingkatkan, sebagaimana dibuktikan dengan meningkatkan resolusi difraksi dan data yang dapat direproduksi dari plot Wilson relatif. Saya tidak pernah dengan hat i-hati melacak jumlah eksperimen gravitasi kecil yang telah dilakukan oleh kelompok Bermingham dalam penerbangan anta r-jemput dan bar u-baru ini dikoordinasikan di stasiun ruang angkasa, tetapi hasil yang saya lihat dalam ulasan bar u-baru ini termasuk dalam percobaan. Jika sampel dipilih dengan cermat dari berbagai percobaan Bumi sebelum penerbangan luar angkasa, alam semesta mungkin dapat membuat peningkatan yang signifikan dalam kualitas kristal. Pada saat penulisan naskah ini (Januari 2015), sebuah eksperimen pertumbuhan kristal protein besar bar u-baru ini menjadi reli dan rapat umum dan rapat umumnya untuk mengevaluasi potensi jangka panjang pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Dari Stasiun Luar Angkasa untuk dianalisis oleh C O-Researchers. Untuk protein, banyak dari percobaan penyebaran uap ini mungkin memiliki kesempatan untuk mendapatkan kristal yang berguna dari protein, yang sulit dalam percobaan kristalisasi di tanah, sehingga di tanah. Eksperimen pertumbuhan kristal protein “langka” yang hampir gagal di alam semesta. Konsekuensi yang paling menjanjikan adalah eksperimen spasial protein yang telah berhasil dalam kristalisasi di Bumi dan telah dipelajari dalam jangkauan yang luas. [132] Dalam subset protein ini, urutan kristal ditingkatkan, sebagaimana dibuktikan dengan meningkatkan resolusi difraksi dan data yang dapat direproduksi dari plot Wilson relatif. Saya tidak pernah dengan hat i-hati melacak jumlah eksperimen gravitasi kecil yang telah dilakukan oleh kelompok Bermingham dalam penerbangan anta r-jemput dan bar u-baru ini dikoordinasikan di stasiun ruang angkasa, tetapi hasil yang saya lihat dalam ulasan bar u-baru ini termasuk dalam percobaan. Jika sampel dipilih dengan cermat dari berbagai percobaan Bumi sebelum penerbangan luar angkasa, alam semesta mungkin dapat membuat peningkatan yang signifikan dalam kualitas kristal. Pada saat penulisan naskah ini (Januari 2015), sebuah eksperimen pertumbuhan kristal protein besar bar u-baru ini menjadi reli dan rapat umum dan rapat umumnya untuk mengevaluasi potensi jangka panjang pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Dari Stasiun Luar Angkasa untuk dianalisis oleh C O-Researchers. Kristalisasi di tanah diharapkan untuk protein banyak eksperimen difusi uap semacam itu di alam semesta, dengan harapan bahwa kesempatan untuk mendapatkan kristal yang berguna dari protein, yang sulit dalam kristalisasi di tanah, di alam semesta. Eksperimen pertumbuhan kristal protein “langka” yang hampir gagal di alam semesta. Konsekuensi yang paling menjanjikan adalah eksperimen spasial protein yang telah berhasil dalam kristalisasi di Bumi dan telah dipelajari dalam jangkauan yang luas. [132] Dalam subset protein ini, urutan kristal ditingkatkan, sebagaimana dibuktikan dengan meningkatkan resolusi difraksi dan data yang dapat direproduksi dari plot Wilson relatif. Saya tidak pernah dengan hat i-hati melacak jumlah eksperimen gravitasi kecil yang telah dilakukan oleh kelompok Bermingham dalam penerbangan anta r-jemput dan bar u-baru ini dikoordinasikan di stasiun ruang angkasa, tetapi hasil yang saya lihat dalam ulasan bar u-baru ini termasuk dalam percobaan. Jika sampel dipilih dengan cermat dari berbagai percobaan Bumi sebelum penerbangan luar angkasa, alam semesta mungkin dapat membuat peningkatan yang signifikan dalam kualitas kristal. Pada saat penulisan naskah ini (Januari 2015), sebuah eksperimen pertumbuhan kristal protein besar bar u-baru ini menjadi reli dan rapat umum dan rapat umumnya untuk mengevaluasi potensi jangka panjang pertumbuhan kristal protein di bawah gravitasi mikro. Dari Stasiun Luar Angkasa untuk dianalisis oleh C O-Researchers. Untuk protein
Kolaborasi Schering-Plough dengan kelompok Nagg berkembang menjadi program studi struktur kristal limfokin dan sitokin yang ekstensif dan berkembang. Schering-Plough tidak memiliki program kristalografi pada saat itu, sehingga kolaborasi awal pertumbuhan kristal dengan Nagg dan kelompoknya dengan cepat meluas ke apa yang mereka kembangkan untuk aplikasi komersial potensial. Bill Cook bekerja sama dengan kelompok Nagg dalam kristalisasi protein ini, dan Steve Erick akhirnya memproduksi interferon gamma manusia [120, 153], faktor perangsang koloni granulosit-makrofag manusia (GMCSF) [137, 155], memimpin penelitian kristalografi untuk menentukan struktur interleukin-4 manusia [149, 156]. Mark Walter bekerja sama dengan Steve Ehrlich dan Bill Cook dalam studi kristalografi ini dan melanjutkan kolaborasinya dengan Nag dan kelompoknya setelah saya meninggalkan UAB. Pekerjaan ini membuat Nag dan saya, atas nama kelompok UAB dan Schering-Plough, menerima Penghargaan Milstein tahun 1994 untuk Penelitian Interferon dan Sitokin. Studi struktural ini dimungkinkan berkat kontribusi signifikan dari Steve Ehrlich, Bill Cook, Mark Walter, dan Vijay Senadi di UAB, dan Paul Trotta, Paul Reichert, G. S. Hammond, dan H. V. Le di Schering-Plough. Nag dan saya memilih untuk menerima penghargaan ini atas nama kelompok ahli kristalografi dan biokimia yang luar biasa ini.
Penelitian bersama dengan Schering Pau juga menciptakan karya seni baru yang indah yang mengekspresikan struktur protein dengan ukiran kayu. Dalam kelompok akademik, proyek semacam itu tidak pernah dilakukan, tetapi Interferon dan Lymphacane adalah produk komersial utama untuk Schering PraU, tepat setelah kami menyelesaikan struktur interferon gamma. Jersey, kami sangat ingin menunjukkan pencapaian kristal kami. Pada waktu itu, Bebe bekerja di galeri seni yang indah yang berspesialisasi dalam patung menggunakan berbagai bahan di Birmingham dan tahu kary a-karya indah yang seniman lokal, Craig Nut, adalah ukiran kayu. Bebe dan saya bertemu dengan seorang Craig yang tidak ada hubungannya dengan struktur molekul dan menunjukkan beberapa struktur interferon gamma yang diwakili oleh Mike Carson dalam grafik komputer. Dia kewalahan dengan kompleksitasnya, tetapi khususnya tentang keindahan struktur interferon. Dia memberikan perkiraan waktu dan pengeluaran yang diperlukan untuk secara akurat mengukir struktur ini. Saya pikir Schering Prau tidak bisa berinvestasi dalam usaha ini. Craig dan Mike Carson menghabiskan berja m-jam dengan sistem grafik kami sampai Craig yakin dan mulai mengukir. Hasilnya menakjubkan (Gbr. 24). Gambar 24
Gambar 24: Interferon gamma yang indah diukir dengan kayu ceri, diminta untuk menghiasi lobi pusat penelitian baru perusahaan farmasi Scheling Prow di New Jersey. Kiri adalah T. L. Craig adalah patung skala kecil dengan struktur yang diselesaikan sebelum memulai patung besar. Berkat kolaborasi antara Craig dan Mike Carson, moleku l-molekulnya diukir dalam skala yang hampir sempurna.
Kristal protein telah membuat kemajuan besar pada 198 0-an, dan kecepatan, yang menentukan struktur protein baru, telah mengingatkan pada pertumbuhan kristalisasi molekul rendah yang saya alami pada 196 0-an dan 197 0-an. Pada awal 196 0-an ketika saya menulis disertasi doktoral, itu adalah tantangan besar untuk menentukan struktur hipotalol organik, tetapi semua struktur baru pada dasarnya penting dalam memahami ikatan kimia dan interaksi interkodal. Pada akhir 198 0-an, ribuan struktur molekul rendah ditentukan dan terdaftar dalam database struktur Cambridge. Berkat kemajuan metode langsung dari metode pengumpulan data fase dan otomatis, telah menjadi masalah untuk menentukan sebagian besar struktur kristal molekul rendah, dan di sebagian besar fakultas tugas, bahkan jika itu bukan ahli, Ini bukan seorang ahli. Bank Data Protein Brook Heaven hanya memiliki ratusan struktur pada saat itu, tetapi pada 198 0-an, saya merasa bahwa kristalisasi protein berada di tengah revolusi yang sama. Namun, fasilitas synchrotron dan teknologi konversi fase baru yang dijanjikan untuk secara cepat meningkatkan kecepatan struktur kristal protein baru dalam waktu dekat. 198 0-an adalah masa yang luar biasa di bidang ilmu kristal protein.
Pada tahun 1987, saya diberkati dengan kesempatan untuk melayani sebagai ketua Crystal Amerika Serikat, dan memutuskan untuk fokus pada masa depan kristalisasi protein dalam kuliah setelah makan malam di Philadelphia ACA. Saya menunjukkan tingkat pertumbuhan masa lalu dari basis data struktur Cambridge dengan laju pertumbuhan bank data protein Brookhaven saat ini, dan membandingkan tingkat pertumbuhan struktur kristal protein baru saat ini dengan tahap awal kristalisasi molekul rendah. rapi. Dengan asumsi bahwa dua fungsi pertumbuhan ini akan hampir sama, saya menyarankan bahwa ribuan struktur kristal protein baru dapat dibuat dalam beberapa tahun ke depan. Proposal ini dilihat oleh kolega dengan banyak skeptis, tetapi proposal ini telah memicu saya bagaimana saya ingin menghabiskan sisa karir penelitian. Saya telah mengalami perubahan drastis dalam kristal molekul rendah, yang telah bergeser dari keahlian kristal khusus dari khusus ke sehar i-hari. Dan kristalisasi protein juga memiliki perasaan menakutkan bahwa era alat yang secara luas diadopsi oleh no n-ekspert tidak begitu jauh. Tentu saja, ini adalah hal yang hebat untuk sains, tetapi di masa depan juga dapat mempengaruhi peran para ahli kristalologi.
Pikiran saya tentang masa depan sains kristal protein semakin tercerahkan oleh peristiwa yang tidak biasa yang terjadi pada akhir 198 0-an ketika saya adalah komite penelitian biologis sel molekuler NIH untuk ilmu kristal protein. Dia telah disarankan oleh subsidi yang menarik dari ahli biologi molekuler, tetapi dia tidak memiliki pengalaman dalam studi kristal. Dia menyadari bahwa struktur memiliki kepentingan utama dalam memahami biologi sistem penelitiannya, dan dia tidak ingin bergantung pada prosedur ini. Saya memutuskan untuk mempelajari apa yang saya butuhkan untuk dapat menggunakan kristal protein dalam program penelitian biologi molekuler saya. Pada waktu itu, itu adalah bid’ah bagi mereka yang bukan kristalisasi untuk menyediakan dana untuk proyek analisis struktural kristal protein, tetapi para ilmuwan adalah Hamilton Smith, yang telah memenangkan Hadiah Nobel dalam enzim terbatas. Smith terdaftar di John’s Hopkins Medical University, dan kristalisasi protein yang sangat baik Ed Ratman akan menjadi tutornya. Kami pikir itu salah untuk menolak proposal itu, dan ditunjuk sebagai ketua komite inspeksi lokal oleh subkomite penelitian.
Namun, tampaknya semakin besar kemungkinan bahwa kristalografi akan diadopsi sebagai alat penting dalam bidang selain kristalografi, di semua bidang biologi molekuler, bioteknologi, dan penelitian farmasi. Saya mulai memikirkan di mana saya ingin karir masa depan saya sesuai dengan skenario ini dan menjadi yakin bahwa desain obat berbasis struktur adalah pilihan yang menarik.
Jika kristalografi protein berkembang secepat yang saya harapkan, komunitas kristalografi perlu mempersiapkan cara menangani proliferasi data struktural baru yang akan menantang database dan jurnal. Saya telah merasakan secara langsung betapa kuat dan bergunanya Cambridge Structural Database dalam membuat data struktural untuk molekul-molekul kecil tersedia secara luas, dan saya telah mengalami secara langsung betapa kuat dan bergunanya Cambridge Structural Database dalam membuat data struktural untuk molekul-molekul kecil tersedia secara luas. , dan saya telah mampu memproses aliran besar data kristalografi molekul kecil. Saya tahu sedikit tentang infrastruktur yang luas dan staf yang dikumpulkan secara profesional di Cambridge. Pada saat itu, Bank Data Protein Brookhaven, tempat penyimpanan data struktur protein, juga dihadapkan pada permintaan yang meningkat pesat dari komunitas kristalografi dan biologi untuk mengimbangi peningkatan dramatis dalam data struktur protein dengan situasi serupa dalam waktu dekat.
Dari tahun 1988 hingga 1994, saya adalah anggota Institut Nasional Brook Heaven untuk Biologi dan diangkat sebagai Ketua Komite Penasihat Bank Data Protein Brook Heaven pada tahun 1992. Komite Penasihat kami berada dalam posisi untuk mengevaluasi seberapa baik Brook Heaven siap menanggapi pertumbuhan yang diharapkan, sehingga Brook Heaven dapat menanggapi aliran data baru yang diharapkan dengan baik. mungkin. Pada saat itu, Tom Kettsul, direktur bank data, memberikan banyak kontribusi untuk program dan bekerja keras untuk mengoperasikan aset nasional yang penting ini. Komite Penasihat kami sangat merasa bahwa Keture sangat kekurangan dana dan personel dalam menanggapi masa depan, dan dengan jelas menyampaikan pendapat kami kepada manajemen atas Surga Brook. Kami merasa bahwa tim manajemen Brook Heaven memahami pentingnya fasilitas dan memahami perlunya meningkatkan dana dan staf yang diperlukan untuk memenuhi permintaan di masa depan. Kami juga membantu meningkatkan masalah ini untuk kepentingan nasional, dan akhirnya NIH dan NSF akan menambahkan pengaruh dan dana mereka, dan data struktural protein akan banyak digunakan di komunitas internasional. Sayangnya, Brook Heaven bukan salah satu fasilitas bank data protein akhir. Ketika saya akhirnya melihatnya, Protein Data Bank saat ini adalah anggota Institut Penelitian Nasional Brook Heaven untuk Brook Heaven National Research Institute, anggota Brook Heaven National Research Institute, dan 1992. Pada tahun itu, ia ditunjuk sebagai ketua dari tersebut Komite Penasihat Bank Data Protein Brook Heaven. Komite Penasihat kami berada dalam posisi untuk mengevaluasi seberapa baik Brook Heaven siap menanggapi pertumbuhan yang diharapkan, sehingga Brook Heaven dapat menanggapi aliran data baru yang diharapkan dengan baik. mungkin. Pada saat itu, Tom Kettsul, direktur bank data, memberikan banyak kontribusi untuk program dan bekerja keras untuk mengoperasikan aset nasional yang penting ini. Komite Penasihat kami sangat merasa bahwa Keture sangat kekurangan dana dan personel dalam menanggapi masa depan, dan dengan jelas menyampaikan pendapat kami kepada manajemen atas Surga Brook. Kami merasa bahwa tim manajemen Brook Heaven memahami pentingnya fasilitas dan memahami perlunya meningkatkan dana dan staf yang diperlukan untuk memenuhi permintaan di masa depan. Kami juga membantu meningkatkan masalah ini untuk kepentingan nasional, dan akhirnya NIH dan NSF akan menambahkan pengaruh dan dana mereka, dan data struktural protein akan banyak digunakan di komunitas internasional. Sayangnya, Brook Heaven bukan salah satu fasilitas bank data protein akhir. Ketika saya akhirnya melihatnya, Protein Data Bank saat ini menjadi anggota Universitas Ratgus dan PBB. 1988 dan 1994, sebagai anggota Institut Nasional Brook Heaven untuk Biologi, dan pada tahun 1992. Dia juga ditunjuk sebagai Ketua Brook Heaven Komite Penasihat Bank Data Protein. Komite Penasihat kami berada dalam posisi untuk mengevaluasi seberapa baik Brook Heaven siap menanggapi pertumbuhan yang diharapkan, sehingga Brook Heaven dapat menanggapi aliran data baru yang diharapkan dengan baik. mungkin. Pada saat itu, Tom Kettsul, direktur bank data, memberikan banyak kontribusi untuk program dan bekerja keras untuk mengoperasikan aset nasional yang penting ini. Komite Penasihat kami sangat merasa bahwa Keture sangat kekurangan dana dan personel dalam menanggapi masa depan, dan dengan jelas menyampaikan pendapat kami kepada manajemen atas Surga Brook. Kami merasa bahwa tim manajemen Brook Heaven memahami pentingnya fasilitas dan memahami perlunya meningkatkan dana dan staf yang diperlukan untuk memenuhi permintaan di masa depan. Kami juga membantu meningkatkan masalah ini untuk kepentingan nasional, dan akhirnya NIH dan NSF akan menambahkan pengaruh dan dana mereka, dan data struktural protein akan banyak digunakan di komunitas internasional. Sayangnya, Brook Heaven bukan salah satu fasilitas bank data protein akhir. Ketika saya akhirnya melihatnya, bank data protein sekarang adalah Ratgus University dan PBB.
Saya juga menjabat sebagai edito r-d i-chief Acta Crystallographica dan anggota komite jurnal Komite IUCR antara 1987 dan 1996 (Gambar 25). Di paruh kedua edito r-d i-chief Acta Cryst. . Memahami struktur protein masih berkembang, dan sebagian besar protein baru dan struktur kristal asam nukleat sangat menarik dalam biologi struktural dan komunitas biologi molekuler. Akibatnya, sebagian besar hasil analisis struktural kristal yang sangat molekuler diterbitkan di biokimia dan biologi majalah khusus. Jurna l-jurnal ini, tentu saja, lebih fokus pada signifikansi biologis dari struktur yang diperoleh, daripada detail kristalologis yang memungkinkan hasil struktural. Komite Eksekutif IUCR dan Komite Jurnal secara bertahap khawatir bahwa mereka belum dapat memberikan layanan yang cukup kepada komunitas sains kristal biologis yang berkembang pesat. Penelitian teoritis yang sangat diperlukan dalam ilmu kristal protein, metode dan peralatan baru untuk pengumpulan dan pemrosesan data, kemajuan dalam teori dan prosedur pertumbuhan kristal protein, metode evaluasi untuk analisis struktur kristal, dll. Jelas bahwa jurnal yang dapat mencakup berbagai aspek sekolah tersebut dibutuhkan.
Gambar 25: Pertemuan terakhir antara komite jurnal IUCR (International Crystal Academy) yang diadakan di Seattle pada tahun 1996 dan Komite Eksekutif. Syd Hall, Mike Glazer, Samar Hasnaine, I, John Helliwell, André Authier, Philip Coppens. John Heliwell dan saya telah melakukan penelitian bersama selama bertahu n-tahun dalam berbagai proyek kristalisasi, dan telah menggantikan saya dan menunjuk edito r-d i-chief Acta crystalographica. Andre pensiun dari ketua IUCR pada pertemuan Seattle, dan Philip Copence berhasil. Andre telah bekerja erat dengan saya dalam peluncuran Acta Crystallographica Bagian D dan kristalografi biologis.
Pada akhir 198 0-an, kelompok kristal UAB mulai fokus pada desain obat berbasis struktural [135, 141], dan Min Luo dan muri d-muridnya sedang melakukan penelitian. Minidase dan Sekolah Kedokteran UAB John Voranakis, protein komplementer [150, 163, 167], yang melakukan rapat umum Deloukus dan Narayana belajar. Progra m-program ini kemudian dilisensikan oleh UAB ke Biocryst. UAB juga berfokus pada pendekatan baru untuk pemodelan molekuler, yang dapat banyak digunakan untuk desain drag struktural. Mike Carson adalah metode yang dapat melihat karakteristik yang dapat berguna untuk desain obat bahkan jika Anda bukan seorang cendekiawan kristal, dan program pemodelan kreatif yang berfokus pada pendekatan baru untuk menampilkan protein dengan grafik komputer. Penelitian awal Mike menciptakan algoritma populer untuk ekspresi pita rantai polipeptida [113, 168], dan merancang metode baru yang menampilkan protein dan berinteraksi. Scott Rowland telah memelopori pendekatan kreatif lainnya untuk memprediksi pola interaksi yang dapat diterapkan pada desain obat melalui berbagai kontak anta r-molekul yang ditemukan dalam struktur kristal molekul rendah dari basis data struktural Cambridge. Scott kemudian memperluas penelitian ini sebagai anggota staf Pusat Data Struktural Cambridge dan melakukan penelitian berikut.
Pada tahun 1993, penelitian bersama dengan Biocryst/CIBA Geigy/UAB/SRI telah menghasilkan serangkaian inhibitor kuat [151, 158, 160-162, 166, 170] dan Biocryst. Perdecin) dipilih untuk pengembangan klinis (Gambar 7 dan 26). Inhibitor PNP kedua BCX-5 (Gbr. 26) akan bekerja dengan Warner Lambert Pharmacyutical Company dan mengembangkan pengembangan klinis. Ketika John Mongomery dan saya memilih PNP sebagai target penemuan obat pada akhir 197 0-an, tujuannya adalah untuk mengembangkan obat untuk merawat pasien. Tantangan yang kami hadapi pada tahap itu adalah untuk menghasilkan dana yang kami butuhkan untuk melanjutkan dengan BCX-34 untuk pengembangan klinis. Pada akhirnya, pengembangan inhibitor PNP pada akhirnya akan meremehkan berapa biayanya, tetapi saya membutuhkan banyak uang untuk memulai pengembangan klinis dengan tepat. Hingga tahun 1993, setelah pendirian BioClisto pada tahun 1986, kami kembali ke investor asli berkal i-kali dan mengumpulkan dana tambahan. Ini juga mengumpulkan dana dari beberapa perusahaan modal ventura terkenal dari perusahaan investasi domestik. Namun, investor ini tidak mengambil biaya penuh yang diperlukan untuk pengembangan klinis BCX-34 atau program ekspansi yang direncanakan untuk menyerang target lebih lanjut. Investor kami sangat mahal dan sangat mahal untuk pengembangan farmasi.
Strategi yang ideal bagi kami adalah membuka saham baru (IPO) saham Biysst. Jika stok dibuka, stok akan menjadi aset yang cair dan dapat dibeli dan dijual di pasar publik. Selain itu, aspek bisnis perusahaan transparan dan teru s-menerus dipantau oleh Komisi Sekuritas dan Bursa, sehingga yakin bahwa investor besar dan perusahaan farmasi dapat dengan baik mengevaluasi dan memantau investasi mereka. Saya tidak tahu banyak tentang rincian proses IPO, tetapi modal ventura utama, yang berinvestasi di Bioc Christ, pada saat itu, tahu apa yang dibutuhkan dan tampaknya berguna untuk bergerak maju. Dengan bantuan dan bimbingan mereka, saya sering mengunjungi CEO Bio Christist, bertemu dengan bankir investasi dan analis, dan mulai berbicara tentang kisah Biysst.
Pada paruh kedua tahun 1993, ada dua bank investasi terkemuka yang menginginkan agen IPO, kedua perusahaan memiliki analis teknis yang sangat baik, PNP adalah target yang menarik, desain drag berbasis struktural. Secara khusus, John Montgomery, Mike Carson, dan desain drag berbasis struktural saya diterbitkan saat kami membahas IPO. Bankir dan analis New York biasanya tidak membaca Acta Crystalographica, tetapi orang Amerika ilmiah membaca, dan masalah disertasi kami berbaris di stand New York News pada akhir 1993. Saya dulu. Pada saat itu, pasar saham mulai melunak, dan IPO bioteknologi dengan cepat kehilangan popularitas, tetapi Biysst tampaknya dapat berhasil di IPO. Ban k-Gyo, analis, dan investor besar berpikir akan penting untuk meninggalkan UAB dan bekerja penuh waktu di BioClisto. John Montgomery keluar dari SRI, yang sudah lama bekerja, dan mengambil alih program kimia medis Bio Christist, tetapi sangat penting bagi reka n-rekan Wall Street untuk berhasil membuat IPO sukses.
Saya tidak pernah berpikir untuk berhenti dari UAB dan pindah ke Biocryst. Bahkan setelah John Montgomery pindah ke Bio Christist, saya pikir saya bisa melanjutkan program bersama yang bisa tetap di UAB. Saya telah ke UAB sejak 1968. UAB memiliki program kristal yang kuat, dengan sekelompok mahasiswa pascasarjana yang luar biasa, postdocs dan kolega lainnya. Selain itu, subsidi dari NIH, NASA, organisasi nirlaba, perusahaan farmasi, dll. Berhasil, dan program Crystal Science dalam kondisi sangat baik. Saya sangat senang dengan UAB dan saya di sini sampai saya sudah tua dan pensiun. Saya adalah seorang profesor di Fakultas Biokimia dan Fakultas Genetika Molekuler, dan saya pikir itu mungkin akan aman untuk seumur hidup. Di sisi lain, keberhasilan Bio Christist penting bagi saya. Dari 1986 hingga 1993, saya membujuk tema n-teman saya, keluarga saya, dan oran g-orang penting di sekitar Birmingham dan diinvestasikan oleh Biocryst. Saya sangat percaya apa yang dilakukan Biocryst, kemungkinan inhibitor PNP, dan masa depan desain basis struktural. Namun, saya berpikir bahwa jika saya tidak mendapatkan IPO dan mengumpulkan dana yang diperlukan untuk bergerak maju, masa depan program Bio Kristus akan berada dalam bahaya. Bebe adalah perilaku berisiko tinggi untuk meninggalkan pekerjaan yang stabil di UAB, dan kami telah mendukung keputusan yang saya buat, terlepas dari kenyataan bahwa keluarga kami cenderung mengubah hidup mereka. Bebe mungkin dilakukan dalam keputusan ini.
Pada bulan November 1993, saya secara resmi memberi tahu Sekretariat UAB bahwa ia akan pensiun pada akhir tahun dan ditunjuk sebagai Ketua dan CEO BioClisto. Pada waktu itu, Pusat Kristalisasi Polimer menerima dana besar dari NASA, dan Rally Deluucas adalah orang yang sesuai untuk saya sebagai direktur CMC. Setelah pensiun saya, Departemen Warisan Biokimia dan Molekuler memberi profeso r-profesor maju yang murah hati. Kontrak dengan BioClisto dinyatakan bahwa hingga 10 % dari waktu saya dapat dihabiskan untuk UAB, dan berkat itu, saya akhirnya dapat mengambil alih kepada kepala peneliti lainnya. Saya merasa terhormat menjadi instruktur khusus UAB pada tahun 1993 (saya terpilih sebelum saya menyatakan pensiun saya), dan saya mengucapkan selamat tinggal kepada tema n-teman dan kolega UAB di pesta makan malam resmi pada akhir November. Program Penelitian.
Jadi, pada tanggal 1 Januari 1994, saya melompat ke perusahaan bi o-teknologi dari sarang pembelajaran yang aman. Saya segera menemukan bahwa saya harus banyak belajar dan saya perlu mempelajarinya dengan cepat. Ketika saya berada di UAB, saya sangat terisolasi dari pekerjaan internal Bio Christist, jadi saya tidak tahu banyak selain program desain obat. Saya adalah kepala peneliti dari beberapa subsidi yang tumpang tindih dengan kegiatan bioklistik di UAB, dan UAB memiliki perjanjian lisensi dengan Bio Christist dan memiliki saham bioklistik yang ia perhatikan untuk meminimalkan konflik keuntungan yang dapat terjadi sementara itu. Akibatnya, ketika saya berada di UAB, saya memiliki perbatasan yang cukup jelas antara saya dan Bioc Christ. Saya adalah ketua Komite Penasihat Ilmiah Biocryst, terutama penemuan obat struktural yang struktural dan pemilihan kandidat target baru yang harus dikejar oleh Biocryst, tetapi kegiatan lain di Biocryst. Petugas Keuangan Tertinggi (CFO), Wakil Presiden Pengembangan Klinis (VP), dan Wakil Presiden Urusan Farmasi (VP) adalah orang-orang penting yang bertanggung jawab atas manajemen keuangan dan program pengembangan klinis BCX-34 dan saya miliki tidak pernah bertemu. Saya juga memiliki pengetahuan terbatas tentang kegiatan bisnis yang telah dikerjakan oleh Biocristals selama bertahu n-tahun sejak dana pertama dikumpulkan dari investor.
Selama tiga bulan pertama pada tahun 1994, saya terkonsentrasi pada wortel besar, sebuah IPO, mengundang saya dari UAB. Selama waktu ini, saya menghabiskan banyak waktu di New York daripada Birmingham, dengan bankir investasi, analis, pengacara, dan investor yang diharapkan untuk berpartisipasi dalam saham IPO. Untungnya, modal usaha utama memberi saya dan menasihati saya. Untungnya, perusahaan perbankan investasi yang dipilih sebagai penawaran publik saham IPO memiliki dua analis yang sangat baik, dan mereka sekarang sains di balik hambatan struktural dan penghambatan PNP. Ini sangat penting karena banyak investor potensial sangat tergantung pada rekomendasi analis, terutama di bidang yang muncul seperti bioteknologi. Namun, pada awal 1994, pasar IPO mulai mendingin dengan cepat, dan sangat diperlukan untuk menyelesaikan IPO sebelum jendela pembiayaan sepenuhnya ditutup. Saya berpikir bahwa jika saya belum menyelesaikan IPO, masa depan yang sangat sulit akan menunggu, dan saya mulai membuat mimpi buruk dalam keputusan untuk meninggalkan posisi UAB.
Selain rintangan yang diharapkan dalam meringkas IPO, saya menghadapi dua stumbles yang tidak biasa. Segera setelah ia pindah ke BioClist, ia mengetahui bahwa ia diajukan oleh penasihat investasi yang memperkenalkan dua modal ventura utama ke Biocosto. Dia berharap untuk menerima komisi dari transaksi ini, tetapi ternyata Alabama tidak memenuhi syarat untuk melakukan perdagangan sekuritas, dan Komisi Sekuritas Negara Bagian Alabama akan membayar agen kepada agen tersebut. Dia adalah kejahatan bersalah yang dihukum di Florida, membakar rumahnya untuk menyembunyikan kejahatan setelah perampokan. Agen telah memutuskan untuk melakukan segalanya untuk membayar saham kami untuk mengancam saham kami. Dia berulang kali membuat panggilan yang mengancam untuk penjaminan emisi, analis, dan perusahaan akuntansi, memperingatkan bahwa biokristal telah diajukan dalam kelangsungan hidup jangka panjang. Di antara kenalan saya di New York, lelucon yang saya butuhkan untuk memperluas ruang lingkup asuransi kebakaran jika saya berurusan dengan BioClisto. Selain distribusi besar ini, saya menghadapi auditor perusahaan akuntansi nasional. Auditor terkejut mengetahui bahwa mereka sedikit tidak berpengalaman, Bio Christistes tidak mendapat untung, dan tidak akan meningkatkan keuntungan mereka dalam waktu dekat. Tentu saja, perusahaan bioteknologi lainnya pada dasarnya tidak selesai.
Meskipun telah menghabiskan kemunduran seperti itu dan menghabiskan malam yang mengantuk, kami berhasil di IPO pada 7 Maret 1994 dan mulai berdagang di Bursa Efek Nasdaq di BCRX. Makan malam penutupan tradisional yang diadakan di New York diberi alat pemadam kebakaran dan mesin asap yang terpisah, berdoa untuk keberuntungan sebagai perusahaan yang terdaftar. Kemudian, setiap hari, setiap kali penutupan harga saham diposting, daftar kelas dikirim. Karena dia dipromosikan menjadi profesor di UAB, dia tidak pernah menerima tabel kinerja kecuali untuk menerima lembaran merah muda dalam penyaringan hibah, tetapi dia dievaluasi setiap hari. Segera, menanggapi investor akan menjadi bagian dari kehidupan baru saya, dan semua yang saya lakukan adalah di bawah pemantauan ketat Komisi Sekuritas dan Bursa.
Segera setelah melakukan IPO, saya mulai secara resmi mempelajari uji klinis. CEO sebelumnya telah dengan baik hati memahami apa yang direncanakan dalam uji klinis BCX-34, tetapi terlibat dalam protokol klinis, uji klinis dan manajemen data klinis, dan aplikasi untuk FDA. Sedikit kewalahan. Kami telah memulai uji klinis kecil untuk pasien psoriasis, yang merupakan penyakit melalui sel T yang dapat diharapkan memiliki efek penghambatan PNP, dan untuk BCX-34 untuk pasien dengan limfoma sel T kulit. untuk memulai uji klinis. Semua program klinis ini direncanakan untuk dilaksanakan terlebih dahulu menggunakan persiapan lokal BCX-34, yang tampaknya menjadi risiko minimum pasien. Namun, saya memiliki sedikit pengetahuan tentang pengembangan klinis, dan perusahaan yang lebih kecil tidak memiliki kemampuan untuk mengelola proses ini. Pada saat itu, saya tidak tahu banyak tentang perwakilan utama, jadi bahkan jika resume mereka luar biasa, mereka tidak akan dapat mengevaluasi seberapa efektif mereka dapat mengelola prosesnya. John Montgomery lebih akrab dengan pengembangan klinis, tetapi tidak terlibat dalam manajemen uji klinis, karena ia telah memajukan banyak obat ke uji klinis ketika ia terdaftar di SRI. Kecuali untuk Bub, pada dasarnya semua orang di perusahaan adalah orang asing bagi saya.
Untuk mengatur apa yang harus dilakukan untuk mengembangkan BCX-34 dengan benar, saya akhirnya mengandalkan Nagabouushan, teman terbaik Scheling Plau. Naga memiliki banyak pengalaman dalam program pengembangan klinis di Schering Prau, dan mengira dia bisa sepenuhnya mempercayai nasihatnya. Dia bersedia datang ke Birmingham, mengingat rencana kami dan setuju untuk bertemu dengan orang utama Bio Christist, yang bertanggung jawab atas program pengembangan klinis. Analisis Nago, dua atau tiga hari kemudian, agak tidak menyenangkan. Dia menekankan pentingnya memantau dengan cermat setiap tahap program klinis tanpa kesan berlebihan tentang pengalaman dan latar belakang sumber daya manusia yang akan bertanggung jawab atas penelitian kami. Pada tahap itu, dilaporkan bahwa ujian kedua fase kecil untuk pasien sudah berlangsung, dan hasil awal menjanjikan. Tidak ada masalah keamanan yang jelas. Segera setelah melakukan IPO
Mendengarkan pendapat Naga, saya merasa bahwa saya perlu mengamankan orang yang memenuhi syarat klinis untuk mengawasi program pengembangan farmasi di Bio Christ. Secara khusus, saya tahu dengan baik dan menginginkan orang yang bena r-benar dapat diandalkan. Segera, ide saya beralih ke Bill Cook, seorang mahasiswa pascasarjana dan kolega di UAB. Bangunan itu memperoleh gelar doktor dengan saya melalui program UAB MD/PhD. Setelah menyelesaikan sekolah kedokteran dan ahli patologi patologi, ia memiliki perawatan brilian patologi klinis di UAB dan penelitian berkelanjutan tentang kristalisasi. Dia tidak pernah terlibat dalam uji klinis, tetapi saya merasa bahwa dia memiliki latar belakang dan kecerdasan yang diperlukan untuk dengan cepat memahami program pengembangan klinis Bio Christist. Tetapi pertam a-tama, saya tahu bangunan itu dengan sangat baik dan bena r-benar yakin bahwa dia bisa mempercayai penilaian dan kejujurannya. Saya merasa lega dengan sukacita ketika bangunan itu setuju untuk pindah ke Bioclisto. Dia menjadi wakil presiden senior yang bertanggung jawab atas penelitian, dan menjadi posisi penting sebagai direktur medis yang mengawasi program pengembangan klinis. Bangunan itu dapat terlibat dalam semua aspek penting dari program R& D kami, mendukung kepemimpinan yang berkelanjutan dari Bubs dalam Desain Obat, sehingga kami dapat menambahkan sumber daya manusia yang hebat ke dalam daftar bioklista. Dia memiliki latar belakang yang hebat dalam kristal dan telah terlibat dalam semua aspek sejak peluncuran program PNP. Dia juga memiliki latar belakang klinis.
Tak lama setelah bergabung dengan BioClisto, bangunan ini telah bekerja pada analisis rinci data klinis pada fase kecil pertama dari obat eksternal BCX-34 untuk pengobatan pasien dengan psoriasis dan limfoma sel T kulit. Diumumkan bahwa hasil tes kontras plasebo ini bagus, dan bangunan itu bekerja dengan petugas pengembangan klinis untuk menyiapkan hasil yang terperinci. Setelah menghabiskan pada akhir pekan, bangunan itu menelepon saya pada hari Minggu sore dan mengatakan kepada saya bahwa saya tidak dapat mereproduksi hasil yang dilaporkan baik. Menggunakan data primer dari lokasi klinis, bangunan menghitung bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok plasebo dan kelompok perlakuan obat. Dia menyimpulkan bahwa data ditransfer ke sarjana statistik dan dimodifikasi untuk analisis. Orang yang bertanggung jawab atas pengembangan klinis menghadapi penemuan dan akhirnya merevisi tabel konjugasi acak untuk menunjukkan hasil negatif dengan kuat dan positif. Kami segera memecatnya dan mengirim surat di pagi hari berikutnya untuk memberi tahu FDA. Setelah itu, kami mengadakan konferensi telepon di komunitas investasi, menjelaskan apa yang terjadi dan apa yang akan kami lakukan selanjutnya dalam program pengembangan klinis.
Pemalsuan data klinis adalah kejahatan, dan jika bangunan tidak menemukan data ini merusak pada tahap awal, bio Christist akan menjadi bencana. FDA mengirim tim ke Bio Christist, memeriksa semua catatan kami, dan sepenuhnya memahami apa yang terjadi dan orang macam apa yang terlibat dalam pemalsuan data. Kemudian, FDA menyerahkan kasus ini kepada Kementerian Kehakiman, dan didakwa dengan bekas departemen pengembangan klinis dan diajukan dalam persidangan. Sebagai hasil dari penyelidikan terperinci oleh Kementerian Kehakiman, hanya satu dari Bio Christisto yang terlibat dalam satu orang ini, dan ia berkolaborasi dengan istrinya yang bekerja di salah satu fasilitas uji klinis dan mendapat untung. Hasil klinis sehingga dia bisa menjual. Keduanya dihukum dan dijatuhi hukuman penjara. Di sisi lain, kami melakukan uji klinis BCX-34 skala besar untuk pasien dengan psoriasis dan limfoma sel T kulit di bawah pengelolaan lembaga penelitian klinis terkenal (CRO). Akhirnya, BCX-34 disimpulkan bahwa itu tidak akan cocok untuk pengembangan klinis lebih lanjut. BCX-34 adalah penghambat PNP yang kuat, menunjukkan bahwa data klinis tidak sesuai untuk pengembangan klinis lebih lanjut dari senyawa ini. Warner Lambert Pharmacoutical Company telah menyelesaikan uji klinis fase pertama BCX-5, menunjukkan bahwa senyawa kedua ini tidak cocok untuk pengembangan klinis di masa depan.
Di sisi lain, Vern Schramm dan rekan-rekannya di Albert Einstein Medical University (AECOM) dan rekan-rekannya memegang BCX-34 dan kompleks BCX-5, tetapi zat tempat kesembilan di cincin kompleks, tempat yang terhubung dengan zat yang terhubung dari Of Enzim. Karena senyawa ini tampaknya memiliki obat yang secara signifikan meningkatkan dibandingkan dengan BCX-34 dan BCX-5, BioCliste telah menandatangani perjanjian lisensi dengan ACOM untuk pengembangan hak senyawa ini. Dua dari senyawa ini telah memasuki tahap lanjutan pengembangan klinis. Salah satunya, BCX-1777 (nama umum Folodeshin, Gambar 26), akhirnya dilisensikan oleh perusahaan farmasi yang berbasis di Inggris, Mundipharma, dan dikembangkan di daerah kanker. Inhibitor PNP lain BCX-4208 (nama umum urodeshin, Gambar 26) dilisensikan oleh Roche untuk sementara waktu sebagai perlakuan psoriasic, tetapi akhirnya Roche mengembalikan haknya kepada Bio Christisto. Biocryst terus berkembang sebagai pengobatan gout sampai uji klinis fase kedua.
Gambar 26: Pengembangan telah berkembang di antara senyawa bioklist.
Terutama mengecewakan adalah program jangka panjang kami untuk mengembangkan inhibitor yang berguna secara klinis dari enzim virus – RNA polimerase. Enzim ini sangat penting untuk semua virus RNA, termasuk influenza, hepatitis C dan banyak virus yang bena r-benar berbahaya, seperti Ebola dan Marburg. Karena enzim, sebagai suatu peraturan, cukup konservatif di antara viru s-virus ini, inhibitor polimerase dapat berhasil terhadap banyak target virus. Kami menghabiskan beberapa tahun yang mengecewakan, dengan fokus pada RNA polimerase hepatitis C. Kami berhasil mengembangkan beberapa inhibitor kuat enzim ini, tetapi semua kandidat klinis kami untuk analog nukleosida memiliki profil toksik praklinis yang tidak memungkinkan pengembangan klinis. Sebagai hasil dari upaya bar u-baru ini, Biocryst menemukan bahwa salah satu senyawa dalam portofolio molekul yang dilisensikan oleh AECOM adalah penghambat yang kuat terhadap filovirus hemoragik, termasuk Marburg dan Ebola [124]. Senyawa ini (BCX-4430, Gbr. 26) saat ini secara aktif dikembangkan oleh Biocryst untuk pengobatan infeksi virus Marburg dan Ebola dengan dukungan keuangan untuk unit NIAD dari National Institute of Health. Baru-baru ini, NIAD telah menyimpulkan kontrak Biocryst untuk pengembangan BCX-4430 sebagai bagian dari fase 1 untuk pengobatan penyakit yang disebabkan oleh virus Ebola. Studi BCX-4430 dalam rentang dosis pada primata inhuman yang terinfeksi virus Ebola menunjukkan efek antivirus dan menunjukkan kelangsungan hidup yang signifikan secara statistik. Saat ini, BCX-4430 terletak di fase 1 tes klinis.
Bill Cook telah menjadikan Biocryst pekerjaan yang sangat produktif selama dua tahun sebelum kembali ke peneliti di kelas patologi UAB dan pusat kristal yang sangat ditransmisikan (kemudian berganti nama menjadi pusat biologi struktural). Kami kembali mencari kepemimpinan Biocryst dari UAB, dan kami cukup beruntung untuk menyambut George Omura, darah terkenal dan tuminist di UAB General Cancer Center. Pada waktu itu, George juga anggota Komite Penasihat Kanker FDA (ODAC), yang meneliti aplikasi untuk persetujuan kanker baru, dan memiliki banyak pengalaman dalam desain uji klinis di area kanker. Ini penting untuk bioklistik karena program inhibitor PNP kami terutama berfokus pada kandidat obat ini dalam pengobatan kanker sel T. Untungnya, pada tahun 1996, ia dapat menyambut Dr. J. Claude Bennett dari UAB ke presiden dan pejabat eksekutif tertinggi. Claude adalah anggota Komite Penasihat Sains kami sejak didirikan, jadi ia akrab dengan program kami. Dia adalah seorang ilmuwan dasar yang terkenal, seorang dokter, dan memiliki banyak pengalaman sebagai manajer, jadi dia adalah sumber daya manusia yang luar biasa untuk Bio Kristus. Dia dulu bekerja sebagai pendiri dan direktur Fakultas Mikrobiologi, Direktur Kedokteran, dan Pusat Penelitian College of History untuk UAB. Segera sebelum bergabung dengan Bioc Christ, ia melayani sebagai beberapa klinik di Fakultas Kedokteran Universitas.
Di bawah pelatih BAB, kelompok desain obat telah luar biasa dalam pengembangan protease influenza neira minidase dan serin. Proyek PNP dan Neura Minidase memiliki kedua enzim, dan senyawa yang tersebar melalui saluran pelarut kristal yang telah dibentuk sebelumnya, dikristalisasi dengan skema pengemasan yang dapat segera mengakses situs aktif, jadi ini adalah pedoman yang luar biasa untuk penelitian desain di masa depan pengalaman belajar. Akibatnya, menjadi mungkin untuk merancang penghambat yang kuat terhadap dua target ini. Yaitu, memodelkan senyawa potensial menggunakan struktur asli, menyebarkan senyawanya menjadi kristal enzim asli, menggabungkannya langsung ke situs aktif, menentukan struktur kompleks, dan perubahan apa dalam inhibitor. Obligasi akan dipromosikan lebih lanjut. Proyek PNP menentukan struktur kristal sekitar 40 kompleks yang diperiksa oleh proses berulang ini, mendapatkan banyak informasi tentang fakto r-faktor yang berguna untuk proyek desain di masa depan. Pendekatan desain yang berulang ini adalah untuk meningkatkan potensi klinis inhibitor yang kuat dengan karakteristik yang belum pernah terjadi sebelumnya seperti toksisitas, kelarutan rendah, bioapillabilitas rendah, farmasi yang buruk, dan metabolisme. Dalam banyak kasus, ha l-hal berikut dimungkinkan dengan secara langsung melihat bagian inhibitor mana yang dapat diubah tanpa mengubah interaksi ikatan.
Awalnya, penelitian struktural PNP dilakukan dengan menggunakan cahaya radiasi, tetapi struktur kompleks PNP di Biocryst menggunakan sistem digit area berbasis laboratorium dengan generasi anodemik yang berputar, sistem suhu rendah, dan sistem optik yang terintegrasi dengan cahaya . Semua penelitian Neura Minidase pada akhirnya ditentukan struktur sekitar 120 kompleks penghambatan dalam optimalisasi desain, yang semuanya dikumpulkan dari peralatan internal. Dengan cara ini, perubahan pada senyawa timbal dirancang, senyawa baru disintesis di perusahaan, bagaimana mengikat target dengan struktur kristal kompleks, dan untuk meningkatkan karakteristik inhibitor. , informasi struktural dapat diperoleh dengan cukup cepat. Di bawah pelatih
Mengikuti pendekatan berulang ini, tim BABU mengembangkan Perivir (Gbr. 26), penghambat kuat neuraminidase influenza. Pada tahun 1999, kami mengadakan kemitraan dengan Johnson dan Johnson (J & amp; J) untuk melakukan pengembangan klinis perivir di seluruh dunia. J & amp; J menyarankan Pyramivir untuk fase awal 3 uji klinis Amerika dan internasional, setelah itu ia memutuskan bahwa bioavailabilitas oral yang rendah dari obat tersebut tidak sesuai dengan tujuan komersialisasi mereka. Kami melakukan banyak upaya untuk meningkatkan ketersediaan hayati oral perivir, tetapi tidak berhasil. Koneksi adalah aktivitas yang sangat baik sebagai obat intravena, tetapi minat komersial J & amp; Oleh karena itu, J & ap; Studi klinis telah menunjukkan profil keamanan yang baik dari perivir, dan kemudian tes in vitro terhadap strain flu baru menunjukkan bahwa hubungan memiliki aktivitas terhadap banyak strain flu, termasuk strain burung, yang menyebabkan semakin banyak perhatian sebagai ancaman pandemia yang mungkin. Biocryst berfokus pada pengembangan obat untuk pemberian perivir intravena.
Pemerintah global telah menimbulkan kekhawatiran tentang ancaman influenza baru, dan telah didanai untuk mendukung perawatan baru untuk perawatan influenza melalui HHS (kesehatan dan layanan manusia). Kami memiliki awal yang kuat dalam pengembangan format pengenalan infus di Pelamibiru, termasuk proses pembuatan yang layak, dan berhasil mengajukan permohonan dukungan pengembangan formulasi introduksi infus dari HHS. (Saat ini, BioClisto telah menerima lebih dari $ 200 juta dari HHS dan Otoritas Penelitian dan Pengembangan Lanjutan Biomedis (BARDA) untuk pengembangan Peramibil). Hampir pada saat yang sama, kami diminta oleh perusahaan farmasi Jepang, Yoshinomi Shiono, tentang hak pengembangan Peramibiru di Jepang. Oba t-obatan Syiono yang makmur telah menemukan kemungkinan menerapkan pandemi (tren global) di samping kemungkinan menggunakan pelkill untuk pengobatan influenza musiman. Shiono telah menyelesaikan uji klinis di Jepang, yang menunjukkan bahwa infus infus tunggal Peramibiru efektif dalam mengobati influenza musiman. Agen intrusi tetes ini saat ini ada di pasaran di Jepang dengan nama Lapiacta. Pelamibil juga telah disetujui di Korea sebagai nama produk “Peramiflu” dari Midori Cross Society. Sementara itu, BioCryst melakukan uji klinis tambahan oleh Pelkille dalam pemberian intravena.
Program BIOC Christ untuk inhibitor Procode Serin telah berlanjut sejak stok dibuka pada tahun 1994. Hal pertama yang kami fokuskan adalah inhibitor D-Factor, yang merupakan enzim komplementer bekerja sama dengan peneliti UAB, [163, 167]. Kami berhasil merancang inhibitor faktor D yang kuat (BCX-1470, Gambar 26) dan memasuki fase pertama, tetapi ujian dibatalkan karena profil senyawa tidak ideal. Target berikutnya yang didekati dalam seri ini adalah kompleks Faktor 7A organisasi, yang diharapkan diterapkan pada sistem kardiovaskular. Dalam program ini, BCX-4161, inhibitor yang kuat dari plasma caricrain, protease serin lainnya. Calicrain adalah substansi penyebab dari suatu penyakit yang disebut hemangular edema herediter (HAE), dan merupakan penyakit kronis bencana yang mempengaruhi ribuan pasien di Amerika Serikat. Suntikan inhibitor karclain tersedia secara komersial, tetapi sering kali infus diperlukan. Karena BCX-4161 adalah aktivitas oral, pasien dapat dirawat dengan menggunakan tablet setiap hari, sangat meningkatkan kualitas hidup pasien. BCX-4161 telah menyelesaikan uji klinis fase kedua yang sukses untuk pasien HAE, dan saat ini melakukan uji klinis fase kedua yang lebih besar untuk persetujuan penjualan di Amerika Serikat.
Sementara itu, BAB dan timnya terus merancang penghambat caricrain generasi kedua yang ditingkatkan. Pada tahap ini, kami telah memperoleh pengalaman desain yang sukses dengan struktur asli enzim saja, bahkan jika kami tidak perlu mengulangi analisis struktur kristal dari beberapa kompleks. Selama bertahu n-tahun, mereka secara mengejutkan matang untuk memanfaatkan kekayaan pengalaman yang diperoleh dari program PNP dan Neira Minidase dalam desain cepat inhibitor yang ditargetkan lainnya. Ilmuwan utama dari kelompok kimia medis telah bekerja dengan Baboo selama bertahu n-tahun, tetapi kelompok ini terkejut dengan kecepatan dan efisiensi dari struktur target protein ke inhibitor yang efektif. Masih sulit untuk merancang senyawa yang dapat melewati jalan yang curam untuk membuat pengembangan klinis berhasil, tetapi saya merasa bahwa tujuan awal bahwa desain drag struktural berkembang menjadi alat yang kuat dari BioClisto telah tercapai.
Pada tahun 2006, saya menyatakan niat saya untuk pensiun CEO Bio Christist pada tahun 2007, 65 tahun. Perusahaan telah mencapai panggung untuk fokus pada persetujuan akhir dari kandidat obat baru dan komersialisasi. Kami berpikir bahwa dengan menyambut CEO berpengalaman dari industri farmasi, kami pada akhirnya akan mengembangkan pipa obat kami dan memiliki pengalaman dan kualifikasi untuk mengirimkannya ke pasar. Pada tahun 2006, kami mendirikan divisi BioClisto dalam segitiga penelitian di North Carolina, mengawasi pengembangan dan peraturan klinis (yaitu, terkait FDA). Area ini di North Carolina adalah salah satu tempat terbesar di dunia untuk mengelola pengembangan klinis, karena terkonsentrasi oleh kontraktor bisnis pengembangan dan perusahaan farmasi. Markas besar Bio Christist dipindahkan ke North Carolina setelah menyapa John Stone House sebagai CEO Bio Christist sebagai penerus saya. Semua departemen penelitian tetap di Vermingham dan terus melakukan pekerjaan dengan baik di bawah kepemimpinan Bub, program desain struktural yang berkelanjutan. Saya tetap sebagai ketua direktur hingga pertemuan tahunan pada Mei 2007. Saat ini, saya memiliki kantor di perusahaan Birmingham, dan Bioc Christ murah hati untuk mempekerjakan saya sebagai konsultan. Claude Bennett pensiun beberapa tahun setelah saya pensiun, tetapi dia dan saya bertemu dengan tim desain farmasi setiap minggu. Saya menantikan pelepasan obat yang telah kami kerjakan selama bertahu n-tahun di Birmingham.
Jadi apa yang telah Anda pelajari di industri bioteknologi dalam beberapa tahun terakhir? Pertam a-tama, mengembangkan oba t-obatan sangat sulit, biaya, dan risiko senyawa yang berhasil dalam proses pengembangan tidak dapat diukur. Obat-obatan baru yang disetujui oleh FDA setiap tahun biasanya 20-30 item, tetapi baru-baru ini mereka sedikit lebih baik. Menurut statistik keuangan terakhir yang saya lihat, industri farmasi dan bioteknologi menghabiskan lebih dari $ 50 miliar per tahun untuk R & D. Menurut analisis terbaru dari Universitas Tafutsu, biaya rat a-rata pengembangan oba t-obatan sekarang lebih dari $ 2 miliar. Berapa probabilitas bahwa suatu senyawa akan berhasil melalui proses pengembangan? Saya telah melihat angka dari 1/500 hingga 1/10. 000. Menurut pengalaman BioCryst, probabilitas ini ditingkatkan dengan menggunakan data struktural dalam proses desain dan optimasi obat, tetapi masih banyak senyawa yang menjanjikan telah gagal dalam pengembangan klinis. Berapa lama waktu yang dibutuhkan dari penemuan obat ke pasien? Kami mendirikan BioCryst pada tahun 1986 dan awalnya didasarkan pada beberapa tahun penelitian yang telah selesai di UAB dan SRI. Dalam Bio Christ
Ekonomi perusahaan pengembangan penemuan obat, seperti Biocryst, menarik dan unik. Bio Crystal telah mengalami defisit, atau tanpa laba sejak didirikan pada tahun 1986. Secara umum, ini tidak mengejutkan, mengingat bahwa dibutuhkan waktu lama untuk mengarah pada keberhasilan melalui pengembangan klinis dan proses persetujuan FDA. Namun demikian, Bio Christist telah mempertahankan kemampuan pembayarannya sejak ia mencapai IPO pada tahun 1994. Ada suatu masa ketika pengurangan program dan staf dipaksa, tetapi saya tidak pernah khawatir tentang kelangsungan hidup finansial. Kami biasanya berusaha untuk mempertahankan saldo bank, yang dapat mendukung perusahaan selama setidaknya satu tahun, dan untuk mewujudkan hal ini melalui penjualan saham reguler dan no n-publik. Banyak biaya pengembangan untuk kandidat obat baru telah didanai oleh mitra farmasi, dan BioClisto juga mendapat manfaat dari pengembangan Peramibiru dan BCX-4430. Defisit antara pengeluaran pendapatan dan litbang yang diperoleh dari sumbe r-sumber pendapatan ini telah dimakamkan oleh banyak saham selama bertahu n-tahun. Apakah Anda dapat mengumpulkan dana ini di pasar saham sangat tergantung pada apakah BioCryst adalah perusahaan publik. Ini adalah wortel pertama yang mengundang saya dari dunia akademik untuk mengejar impian mengembangkan oba t-obatan penting yang pada akhirnya mungkin menyebabkan perubahan besar dalam kehidupan pasien.
Gambar 27: Pada pagi hari tanggal 8 September 2006, Bio Kristus dibuka untuk memperingati ulang tahun k e-20. Dari kiri ke kanan (di luar patung setenga h-tubuh pejabat Nasdaq), asisten klerikal saya yang lama, Penny Man, Bebe, CFO Bioc Christ Mike Darwin, pejabat Nasdaq, dan Bio Christist, citra setengah tubuh Randy Riggs, Wakil Presiden, dan Bio Christist, Randy Riggs, Wakil Presiden, dan Bio Christist, Randy Riggs, Wakil Presiden, dan Bio Christist A Randy Riggs, Wakil Presiden, dan Bio Christist A Randy Riggs, Wakil Presiden Bio Christist pengembangan komersial. Ekonomi perusahaan pengembangan penemuan obat, seperti
Sebelum bena r-benar pensiun dari CEO, saya diundang untuk memulai transaksi di Nasdaq Stock Exchange (Sound Opening Bell) untuk memperingati peringatan 20 tahun Bio Christist (Gambar 27). Beberapa kolega dari perusahaan, termasuk Bebe dan bertahu n-tahun asisten kantor Penny Man, berpartisipasi. Saya berbicara tentang sejarah perusahaan, mungkin disimpan di suatu tempat di bursa saham di bursa saham. Namun, sorotan terbesar adalah foto du a-pancaran dari saya dan saya, yang tercermin berkal i-kali di siang hari selama jumbotron Times Square (Gambar 28). Saya menempatkan salinan ekspansi foto ini di kamar mandi rumah saya, dan setiap pagi, sains kristal dalam karier saya, dan banyak yang menarik, menyenangkan dan merangsang. Dalam hidup saya, ada banyak keberuntungan yang membawa saya ke karier kristal. Saya merasa seperti saya pergi ke jumlah kolega yang sangat baik yang telah berkenalan dengan Hadiah Nobel, termasuk para pemenang Hadiah Nobel, yang memiliki kesempatan untuk bekerja sama dalam karier saya. Apakah ada bidang lain yang memberikan peluang seperti itu? Saya juga menyaksikan revolusi besar dalam penerapan kristalisasi dan mengalaminya. Tujuan besar saya pada tahap ini adalah untuk menikmati hidup saya sepenuhnya, hidup panjang, sehat, dan menyaksikan revolusi.
Gambar 28: Bebe dan saya diproyeksikan di NASDAQ Jumbotron Times Square. Layar ditampilkan secara teratur di siang hari, merayakan ulang tahun pendiri bio Christist. Foto ini diperluas ke ukuran poster dan ditampilkan di dinding kamar mandi di rumah.
Referensi
1. Bugg, C. E., Lawson, J. dan Sass, R. L. Simetri kristal dari beberapa garam diazonium.
2. Bugg, C. E., R. dan Sass, R. L. X-ray difraksi Studi Struktur Carbansion Nonplanar. Mulai Bursa Efek Nasdaq (bel berbunyi pembukaan) (Gambar 27). Beberapa kolega dari perusahaan, termasuk Bebe dan bertahu n-tahun asisten kantor Penny Man, berpartisipasi. Saya berbicara tentang sejarah perusahaan, mungkin disimpan di suatu tempat di bursa saham di bursa saham. Namun, sorotan terbesar adalah foto du a-pancaran dari saya dan saya, yang tercermin berkal i-kali di siang hari selama jumbotron Times Square (Gambar 28). Saya menempatkan salinan ekspansi foto ini di kamar mandi rumah saya, dan setiap pagi, sains kristal dalam karier saya, dan banyak yang menarik, menyenangkan dan merangsang. Dalam hidup saya, ada banyak keberuntungan yang membawa saya ke karier kristal. Saya merasa seperti saya pergi ke jumlah kolega yang sangat baik yang telah berkenalan dengan Hadiah Nobel, termasuk para pemenang Hadiah Nobel, yang memiliki kesempatan untuk bekerja sama dalam karier saya. Apakah ada bidang lain yang memberikan peluang seperti itu? Saya juga menyaksikan revolusi besar dalam penerapan kristalisasi dan mengalaminya. Tujuan besar saya pada tahap ini adalah untuk menikmati hidup saya sepenuhnya, hidup panjang, sehat, dan menyaksikan revolusi.
Gambar 28: Bebe dan saya diproyeksikan di NASDAQ Jumbotron Times Square. Layar ditampilkan secara teratur di siang hari, merayakan ulang tahun pendiri bio Christist. Foto ini diperluas ke ukuran poster dan ditampilkan di dinding kamar mandi di rumah.
Referensi
1. Bugg, C. E., Lawson, J. dan Sass, R. L. Simetri kristal dari beberapa garam diazonium.
2. Bugg, C. E., R. dan Sass, R. L. X-Ray Difraction Studies dari Nonplanar Carbanion Struktur. membunyikan bel pembukaan) (Gambar 27). Beberapa kolega dari perusahaan, termasuk Bebe dan bertahu n-tahun asisten kantor Penny Man, berpartisipasi. Saya berbicara tentang sejarah perusahaan, mungkin disimpan di suatu tempat di bursa saham di bursa saham. Namun, sorotan terbesar adalah foto du a-pancaran dari saya dan saya, yang tercermin berkal i-kali di siang hari selama jumbotron Times Square (Gambar 28). Saya menempatkan salinan ekspansi foto ini di kamar mandi rumah saya, dan setiap pagi, sains kristal dalam karier saya, dan banyak yang menarik, menyenangkan dan merangsang. Dalam hidup saya, ada banyak keberuntungan yang membawa saya ke karier kristal. Saya merasa seperti saya pergi ke jumlah kolega yang sangat baik yang telah berkenalan dengan Hadiah Nobel, termasuk para pemenang Hadiah Nobel, yang memiliki kesempatan untuk bekerja sama dalam karier saya. Apakah ada bidang lain yang memberikan peluang seperti itu? Saya juga menyaksikan revolusi besar dalam penerapan kristalisasi dan mengalaminya. Tujuan besar saya pada tahap ini adalah untuk menikmati hidup saya sepenuhnya, hidup panjang, sehat, dan menyaksikan revolusi.
Gambar 28: Bebe dan saya diproyeksikan di NASDAQ Jumbotron Times Square. Layar ditampilkan secara teratur di siang hari, merayakan ulang tahun pendiri bio Christist. Foto ini diperluas ke ukuran poster dan ditampilkan di dinding kamar mandi di rumah.
Referensi
1. Bugg, C. E., Lawson, J. dan Sass, R. L. Simetri kristal dari beberapa garam diazonium.
2. Bugg, C. E., Desiderato, R. dan Sass, R. L. Sebuah studi difraksi sinar-X dari struktur carbanion nonplanar.
3. Bugg, C. E. dan Sass, R. L. Struktur kristal Pyridinium dicyanomethylide.
4. Sass, R. L. dan Bugg, C. E. Struktur kristal kalium paranitrophenyl-dicyanomethide.
5. Bugg, C. E. dan Marsh, R. E.
6. Bugg, C. E., Thewalt, U. dan Marsh, R. E. Biochem.
7. Bugg, C. E. dan Thewalt, J. Efek substituen halogen pada penumpukan basa dalam komponen asam nukleat: struktur 8-kristal bromog anocin. Biochem.
8. Thewalt, U., Bugg, C. E. dan Hettche, A. 1, 1-bis (dimethylamino) -2, 4, 6-triphenylphosphorinium. Angew.
9. Bugg, C. E., Thomas, J. M., M. dan Rao, Stereokimia Nukleik dan Pola Konstituennya. Biopolimer 10: 175-219 (1971).
.
11. Subramanian, E., Trotter, J. dan Bugg, C. E. Struktur kristal etidium bromida.
12. Bugg, C. E. dan Thewalt, U. Serotonin Picrate, struktur kompleks donor-akseptor. Sains 170: 852-854 (1970).
13. Thewalt, U., Bugg, C. E. dan Marsh, R. E.
14. Thewalt, U., Bugg, C. E. dan Marsh, R. E.
15. Thewalt, U. dan Bugg, C. E. kristal dan molekuler serotonin picrate monohydrate.
16. Bugg, C. E. dan TheWalt, U. N 6- (Δ 2-isopentenyl) Struktur kristal adenin, beberapa tRNA ant i-kodon loop basis. Biochem.
17. Bugg, C. E. dan Cook, W. J. Ion kalsium mengikat gula yang tidak bermuatan: Struktur kristal laktosa, galactos, dan kompleks kalsium inositol. J. Chem.
18. Thewalt, U. dan Bugg, C. E. kristal dan molekuler 1, 1-bis (dimethylamino) -2, 4, 6- triphenylphosphorin.
19. Bugg, CE Pola penumpukan basa purin solid-state. Dalam: Simposium Yerusalem tentang Kimia Kuantum dan Biokimia Volume IV. Teori dan Eksperimen Purin (ed. E. d. Bergmann dan B. Pullman), Academic Press, hal. 178-204 (1972).
20. Bugg, CE dan Thewalt, U. Struktur Kristal 6-Histamino Purin Dihidrat.
21. Kolata, G. Sang Caper Kristal Besar. Sains 229:370-371(1985).
22. Freeman, GR, Hearn, RA dan Bugg, CE Struktur Kristal Glikilglisin Fosfat Monohidrat.
23. Hearn, RA dan Bugg, CE Struktur Kristal (-)-Ephedrine Dihydrogen Phosphate.
24. Thewalt, U. dan Bugg, CE Pengaruh Substituen Sulfur pada Ikatan Hidrogen dan Penumpukan Basa: Struktur kristal 6-tioguanosin monohidrat. J. Am. Kimia 94: 8892-8898 (1972).
25. Bugg, C. E. Pengikatan kalsium pada karbohidrat: struktur kristal kompleks kalsium bromida laktosa terhidrasi. J. Am. Kimia 95: 908-913 (1973).
26. Subramanian, E., Madden, J. J. dan Bugg, C. E.. Sinformasi Inosin, Nukleosida Goyangan dalam Beberapa Biokimia.
27. Thewalt, U. dan Bugg, CE Struktur Kristal Kalsium Klorida Tetrahidrat.
28. Cook, WJ dan Bugg, CE Kompleks Laktosa-Kalsium Klorida Heptahidrat.
29. Cook, WJ dan Bugg, CE Pengikatan Kalsium ke Karbohidrat: Struktur kristal garam kalsium bromida terhidrasi dari asam laktobionat. Kristal Akta B29: 215-222 (1973).
30. Sternglanz, H. dan Bugg, CE Konformasi Turunan Adenin Tersubstitusi N6-Monosubstitusi: Struktur kristal N6-metiladenin. Biokimia.
31. Sternglanz, H. dan Bugg, CE A Cyclitol Pentaacetate (±)2-Acetoxymethyl-1, 3, 4, 6-Tetra-O-Acetyl-Epi-Inositol.
32. Thewalt, U. dan Bugg, CE Struktur Kristal 5-Hydroxyuridine.
33. Cook, WJ dan Bugg, CE Pengaruh Interaksi Kalsium pada Konformasi Gula: Struktur kristal myo-inositol kalsium bromida pentahidrat. Kristal Akta B29: 2404-2411 (1973).
34. Cook, WJ dan Bugg, CE Pengikatan Kalsium ke Galaktosa: Struktur kristal kompleks kalsium bromida α-galaktosa terhidrasi. J. Am. Kimia 95: 6442-6446 (1973).
35. Sternikanz, H. dan Bugg, C. E. Struktur kristal dan konfigurasi kimia 2, 4-diamino-5-metil-6-benzylpyrido 2, 3-D pyrimidine acta cryst.
36. Hearn, R. E., Freeman, G. dan Bugg, C. E. Sifat pengikatan konformasi dan fosfat dari phenylethanolamine: Struktur kristal yang bersambung dengan hidrogen. J. Am.
37. Stern glanz, H. dan Bugg, C. E. Konformasi N6-methyladeneine, basis yang terlibat dalam proses restraksi modifikasi DNA.
38. Cook, W. J. dan Bugg, C. E. Interaksi kalsium dengan D-glukan: α, α-trehalose-kristal struktur culcininocaride Brome. Carbohyd.
39. Cantrell, C. E., D. E., R. A. Tetrahedron Letters 44: 4379-4382 (1973).
40. Bugg, C. E. Konstruksi Kimia Kristal.
41. Einspahr, H. dan Bugg, C. E. Kalsium ikatan dengan asam amino: struktur kristal L-glutamat.
42. Freeman, G. R dan Bug, C. E. Donner-Geometrik Geometri: 1-metil nikotin amida iodida, klorida dan struktur garam pyral. Acta Cryst.
43. Gartland, G. L., Freeman, G. R. .
44. Hearn, R. A. Acta Cryst.
45. sternlanz, H., Einspahr, H. M. J. Am.
46. Stern glanz, H. dan Bugg, C. E. hubungan haloge n-derivatif antara sifat mutan dan karakteristik susun dasar. Struktur kristal 5-chloro-dan 5-bromurasil. Biochim.
47. Bugg, C. E. dan TheWalt, U. Efek dari Sulfur Sulfur Sulfur Sulfural Sifat-sifat: Guanin Purate Ichimizu dan 6-theog Animpiclate Ichimizu Jepang. Acta Cryst.
48. Freeman, GR dan Bugg, CE Struktur kristal Procaine Dihydrogen Orthophosphate. Kristal Akta B31: 96-101 (1975).
49. Bugg, CE dan Sternglanz, H. Sifat Struktural Analog Purin dan Pirimidin. Dalam: Farmakologi Molekuler dan Kuantum (ed. ED. Bergmann dan B. Pullman), Academic Press, Jerusalem, 473-500 (1975).
50. DeLucas, LJ dan Bugg, CE Pengikatan kalsium pada residu asam D-glukuronat: Struktur kristal garam kalsium bromida terhidrasi dari asam D-glukuronat. Karbohidrat Res. 41:19-29 (1975).
51. Cook, WJ dan Bugg, CE Struktur Kristal Azathioprine Dihidrat dan 6-Methylmercaptopurine Trihydrat. J. Sci.
52. Pitner, TP, Sternglanz, H., Bugg, CE dan Glickson, JD Studi Resonansi Magnetik Nuklir Proton tentang Rotasi Internal yang Terhalang dari Gugus Dimetilamino N6, N6-Dimetiladenin Hidroklorida dalam Larutan Berair. 97:885-888 (1975).
53. Cook, WJ dan Bugg, CE Jembatan Kalsium-Karbohidrat Terdiri dari Gula Tak Bermuatan: Struktur kompleks kalsium bromida terhidrasi dari α-fucose. Biokimia.
54. Sternglanz, H., Freeman, GR dan Bugg, CE Struktur Kristal 5-Iodouracil.
55. Sternglanz, H. dan Bugg, CE Struktur kristal dan pola penumpukan dasar ribosida 6-kloropurin. Kristal Akta B31: 2888-2891 (1975).
56. Cook, W. J., Thewalt, U. dan Bugg, C. E.. Pengikatan kalsium pada lipid nonionik: struktur kristal kompleks geraniol-kalsium klorida. Biokimia. Res. Kom. 68:143-148 (1976).
57. Cook, WJ dan Bugg, CE Pengaruh Interaksi Kalsium pada Konformasi Gula: Struktur kristal β-D-fruktosa-kalsium bromida dihidrat. Kristal Akta B32: 656-659 (1976).
58. Sternglanz, H., Subramanian, E., Lacey, JC dan Bugg, CE Interaksi ion logam terhidrasi dengan nukleotida: struktur kristal barium adenosin-5′-monofosfat. Biokimia 15: 4797-4802 (1976).
59. Cook, WJ dan Bugg, CE Struktur Kompleks Kalsium-Karbohidrat. Dalam: Interaksi Logam-Ligan dalam Organik dan Biokimia (ed. B. Pullman dan N. Goldblum), D. Reidel Publishing Co., bagian 2, hal. 231-256 (1977).
60. Abruscato, GJ, Kiely, DE, Cook, WJ dan Bugg, CE Delta Dicarbonyl Sugars VI. Pembuatan trihaloheptulosa yang tidak biasa dari asam xilarat. J. Org. Kimia 42: 3567-3571 (1977).
61. Sternlanz, H., Thomas, J. M. dan Bugg, C. E. pola laminasi puding yang berdedikasi halogen: struktur kristal 8-kristal bromoinosin. Acta Cryst.
62. delucas, L. J., Hearn, R. A. Acta Cryst.
63. Gartland, G. L. dan Bugg, C. E. Struktur kristal 2′-deoxy-6- thioguanosine monohydrate.
64. Einspahr, H. M., Gartland, G. L. dan Bugg, C. E. α-amino Acid Bonds: Struktur kristal L-glutamat-kalsium klorida. Acta Cryst.
65. Einspahr, H. M. dan Bugg, C. E. Struktur kristal kalsium asam amino.
66. Einspahr, H. M., Bugg, C. E. dan Cook, W. J. Geometri Kalsium: Efek Saling Air dalam Hydro Kristal. Dalam: Protein pengikat kalsium dan fungsi kalsium (ed. Rh. Wasserman), North-Holland, pp. 76-77 (1977).
67. Adams, M. J., J. R. dan Bugg, C. E. Struktur dehidrogenase 6-fosfoglukonat dari Livertion Domba.
68. Delucas, L. J., Suddath, F. L., Gams, R. A.
69. abbrahams, S. C., J. L., Bugg, C. E. dan Hvosleef, J. Perbandingan dua penentuan independen dari kalsium l-askorbat hidrat.
70. Delucas, L. J., Gartland, G. L. dan Bugg, C. E. D-Sodium Bond untuk residu: Struktur kristal natrium D-glukronat. Carbohyd.
71. Fontecilla-Camps, J. C., Bugg, C. E., Temple Jr., C., J. D., Montgomery, J. A. G. M.
72. Fontecilla-Camps, J. C., Suddath, F. L., Bugg, Wattt, Wattt, D. D. J. Mol.
73. Eiinspahr, H. M.
74. Meehan Jr., E. L., Einspahr, H. M. Acta Cryst.
75. Stern glanz, H., Graves, D. E., L. W.
76. Cook, W. L., Suddy, F. L., Bugg, C. E. dan Goldstein, G. Protein kromosis nonhistone, kristalisasi ubiquitin dan penelitian pendahuluan oleh X-Ray. J. Mol.
77. Einspahr, H. M.
78. Stern glanz, H. dan Bugg, C. E. Konformasi turunan adenin N (6) yang disubstittited: N (6) -Methyl adenin hidroklorida dan N (6), N (9) -Trimethyl adenine crystor Struktur. J. Cryst.
79. Fontecilla-Camps, J. C., Bugg, C. E., Temple Jr., C., Rose, J. A. J. Am.
80. Delucas, L. L. Einspahr, H. M. Acta Cryst.
81. Einspahr, H. M. dan Bugg, C. E. Geometri interaksi kalsium-air dalam hidrat kristal.
82. Brown, E. A. Acta Cryst.
83. Cook, W. L Einspahr, H. Ly, T. L., Urry, Struktur Kristal dan Konformasi Trimer Siklik Ofpti DE elastin, Cyclo- (L-Valyl-L-Polyl-Glycyl-L-Valyl-Glycyl) J. Chem.
84. cook, W. L., Gartland, G. L. dan Bugg, C. E. Conforation of O (6) -Substitusi Purine Turunan: Struktur Kristal Puding 6-Metoksi. Acta Cryst.
85. Brown, E. A. J. Cryst.
86. riordan, J. M., Kiely, D. E., Delucas, L. L., Einspahr, H. M., Bugg, C. E. Rantai cabang Halo dan amino clitol: Sintesis dan studi kristal x-ray. Carbohyd.
87. Cook, W. J., Dedman, J. R., Means, A. R. dan Bugg, C. E. Calmodulin dan Survei X-rays awal. J. Biol.
88. Cook, W. J., Bugg, C. E., Dedman, J. R. dan Means, AR.
89. Einspahr, H. dan Bugg, C. E. Geometri kalsium-karboksilat dalam kompleks kristal.
90. Fontecilla-Camps, J. C., Almassy, R. J., Suddy, F. L., Watt, D. D. dan Bugg, C. E. Venom Scorpion: Struktur tiga dimensi protein turunan: kelas struktural baru neurotomi. Prop. Nat.
91. Cook, W. J., Ealick, S. E., Bugg, C. E., Stoeckler, J. D. dan Parks Jr., R. E. J. Biol.
92. Eiinspahr, H. M., Cook, W. J. dan Bugg, C. E. Konformasionalitas dalam oligonukleotida untai tunggal: adenil- (3 ‘, 5’) Struktur. Biochem.
93. Fontecilla-Camps, J. C., Almassy, Ealick, Suddath, F. L., Watt, D. D. Tren.
94. Suddath, F. LI, Ealick, S. E., R. J.
95. Fontecilla-Camps, J. C., Almassy, Suddy, F. L.
96. Meeehan Jr., E. J., J., Einspahr, H. M., Bugg, C. E. dan Suddath, F. L.
97. Hogan, A, Ealick, S. E., Bugg, C. E. dan Barnes, S. Pola aglomerasi empedu: Kalsium klorida tujuh hidran. J. Lipid Res.
98. Almassy, R. J., Fontecilla-Camps, J. C. S Ewing disempurnakan di 1. 8A.
99. Einspahr, H. M., Bugg, C. E. Kalsium kompleks penelitian struktural kristal dan saran untuk sistem biologis. Dalam ： Dalam: ion logam dalam sistem biologis, vol. 17: kalsium dan perannya dalam biologi (ed. H. Sigel), Marcel Dekker: Basel, Swiss, pp. 51-97 (1983).
100. Krishna, N. R., Bugg, C. E., R. L. dan Watt, D. D.
101. Adams, M. J., Archibald, I. G., Carne, A., Gover, Helliwell, J. R. Ure Domba 6-fosfoglukonat dehidrogenase pada resolusi 2. 6A.
102. Sack, J. S., Bugg, C. E. dan Cook, W. J. Struktur Kristal Calmodulin. Dalam: Protein yang terikat kalsium dalam kesehatan dan penyakit (diedit oleh E. Carafoli dan lainnya), hlm. 163-164 (1983).
103. Ant-2 Survei X-Ray Pendahuluan: Reversibel antara Bentuk Kristal Bukti metastasis. J. Biol.
104. Zell, A., Einspahr, H. M. Struktur kristal kalsium etilmalonat. Biochem.
105. smith, C. D., Delucas, L. J., Schweitz, H., Bugg, C. E. dan Survei X-Ray Lazdunski. J. Biol.
106. Zell, A., Ealick, S. E. NY, hlm. 65-97 (1985).
107. Vijay-Kumar, S., Bugg, C. E., Wilkinson, K. D. Prop. Nat.
108. Babu, Y. S., Sack, J. S., Greenhough, T. G., Bugg, C. E., Means, A. R. dan Cook, W. J. Calmodulin. Alam 315: 37-40 (1985).
109. cook, W. J., Ealick, S. E., Krenitsky, T. A., Stoeckler, J. D., J. riwell, J. R. dan Bugg, C. E .. Kristalisasi Penelitian Pincacular dan Pendahuluan Escherichia Coli. J. Biol. Chem.
110. N, S., Parks Jr., R. Sel darah merah manusi a-Type pinstreoside holase tig a-dimensi. Annals N. Y. Acad.
111. Nettesheim, D. G., Bugg, C. E., N. R. dan Watt, D. D. Struktur dan Fungsi (ed. Kobble, K. et al.), Pierce Chemical Co, Rockford, IL, pp. 843-846 (1985).
112. Stoeckler, J. D., Ealick, S. E., Bugg, C. E. dan Parks Jr. “Desain Penggunaan”, Fed.
113. Carson, W. M.
114. BUGG, C. E. Pertumbuhan kristal protein dalam ruang. Prop. Pharm.
115. Montgomery, J. A., Thomas, H. J. 753 (1985).
116. Bugg, C. E. Masa depan pertumbuhan kristal protein. J. Cryst.
117. Delucas, L. J., Suddy, Suddy, F. L., Snyder, Namann, Namann, Naumann, Naumann, Broom, Broom, M. B., Pusey, M., Yost, Herit, Herren, B. C. C. C. C. C. C. C. C. C. C. C. C. C. E. Investigasi awal pertumbuhan kristal protein menggunakan pesawat ulan g-alik.
118. Jr., E. J., A. dan Bugg, C. E. Pertumbuhan kristal protein dalam mikrogram.
119. Vijay-Kumar, S., Bugg, C. E. dan Cook, W. J. J. Mol.
120. Vijay-Kumar, S. 、 Senadhi, S. E. 、 Ealick, S. E. 、 Nagabhushan, T. L. 、 Trotta, P. P. 、 Kosecki, R. 、 Reichert, P. 、 、 化 化 の の の 体 の の の の 体 体 体 体 体 の 組換え 組換え 組換え 組換え 体 体 体 体 γ Survei X-Ray Awal. J. Biol.
121. Vijay-Kumar, S., Bugg, CE, Wilkinson, K. D., Vierstra, R. D., Hatfield, P. M. dan Cook, W. J. Perbandingan struktur tiga dimensi ragi dan ragi. J. Biol.
122. DeLucas, L. J., Suddath, F. L., Snyder, R., Naumann, R., Broom, M. B., Pusey, M., Yost, V., Herren, B. dan Bugg, CE tumbuh dewasa. Polim. Persiapan 28: 383-384 (1987).
123. DeLucas, LJ, Greenhough, TJ, Rule, SA, Myles, DA, Babu, YS, Volanakis, JE dan Bugg, CE. J. Mol. 196: 741-742 (1987).
124. Warren, TK, Wells, J., Panchal, R. G., Stuthman, K. S., Garza, N. L., Van Tongeren, S. A., Long, L., Retterer, C. J., Eaton, BP, Pegoraro, G., Honnold, S. , Bantia, S., Kotian, P., Chen, X, Taubenheim, B. R., Welch, L. S., Minning, D. M., Babu, Y. S., Sheridan, WP, dan Bavari, S. Perlindungan terhadap penyakit filovirus dengan spektrum luas yang baru analog nukleosida BCX-4430, Alam 508:402-405 (2014).
125. Babu, YS, Bugg, CE dan Cook, WJ Struktur kristal Calmodulin. Dalam: Protein Pengikat Kalsium 1986: Prosiding Simposium Internasional Kelima tentang Protein Pengikat Kalsium dalam Kesehatan dan Penyakit (ed. N. Anthony dkk.), Academic Press, NY, hal. 305-311 (1987).
126. Struktur tiga dimensi Haru, Y. S., Hako, CE Koroko, dan W. J. Kareem. Dalam: Aspek Molekuler Pengenalan Seluler, Vol. 5 (Calmodulin), hal. 83-89 (1988).
127. Babu, YS, Bugg, CE dan Cook, WJ Penelitian tentang metode pelipatan belakang sinar-X. Metode Enzim 139 : 632-642 (1987).
128. DeLucas, LJ dan Bugg, CE Arah Baru dalam Pertumbuhan Kristal Protein.
129. Babu, Y. S., Bugg, CE dan Cook, W. J. Struktur Calmodulin Disempurnakan pada Resolusi 2. 2A. J. Mol.
130. Bugg, C. E. Kristalisasi biopolimer menggunakan bahan alami. Dalam: Pertumbuhan Kristal dalam Sains dan Teknologi, Seri B: Fisika Vol. 210 (ed. H. Arend dan J. Hulliger), Plenum Press (1989).
131. Krishna, N. R., Nettesheim, D. C., Klevit, R. E., Drobny, G., Watt, D. D. dan Bugg, C. E. Karakterisasi Resonansi Magnetik Nuklir Proton dari Residu Aromatik dalam Neurotoxin Varian-3 dari Centruroides sculpturatus Ewing 28: 1556-1562 (1989).
132. delucas, L. J., Smith, C. O., Smith, Senadhi, S. E., Ealick, Snyder, Snyder, Snyder, P. C. Nelson, McPherson, A., Koszelson, Koszelak, S., Taylor, G. Taylor, G., Stammers, D., K. Bugg, C. E. Pertumbuhan kristal protein dalam mikrogram.
133. BUGG, C. E. Kristalisasi protein dan molekul biologis lainnya.
134. Rowland, R. S., Allen, F. H., W. M. Verlag, NY, pp. 229-253 (1990).
135. Tallography.
136. Rowland, R. S., Carson, W. M. Dalam: Penggunaan kristalografi sinar-X dalam desain agen anti-violal (ed. W. G. Laver dan G. M Air), Pres Academic (1990).
137. Reichert, P., Ealick, S. E., Cook, W. J, Trotta, P., T. L.
138. Penelitian fungsi rotasi. J. Mol.
139., R. E., Chen, S-F. J. Biol.
140. Bugg, C. E. dan Delucas, L. J.
141. Cheisis Phy. Dalam: Kemajuan dalam Kemoterapi AIDS (Ed . B. Diasio dan J. -P. Sommadossi), Pergamon Press (1990).
142. Delucas, L. J., Bugg, C. E. Prosedur pertumbuhan kristal protein untuk pesawat ulan g-alik AS. Dalam: Metode: Companion to Methods in Enzymology, Vol. I, No. 105-109 (1990).
143. Pengembangan. J. Cryst.
144., Ohlendorf, D. H., Einspahr, H. M., Clancy, L. L., M. A., B. M., Nagabhushan, T. L., Nelson, G., McPherson, A, Koszelak, S., Taylor, G. Y, G., Bugg, C. E. Shuttle, S., Taylor, G. Y, G., Bugg, C. E. Penerbangan STS-26 dan Hasil Pertumbuhan Kristal Protein STS-29. J. Cryst.
145. delucas, L. J. dan Bugg, C. E. Protein Crystal Growth In Space.
146. BUGG, C. E. dan Delucas, L. J.
147. Bugg, C. E. dan Delucas, L. J.
148. Pemurnian reduktase aldosa, kristalisasi dan analisis struktur kristal awal. J. Mol.
149. Cook, W. J, Ealick, S. E., Hammond, Hammond, G. S, H. V., Nagabhushan, T. L. J. Mol.
150. Narayana, S. V. L., Kilpatrick, El-Kabbani, O. S. S., Bugg, C. E., Volanakis, J. E. dan Delucas, L. J.。 J. Mol.
151. EAALICK, S. E. 88: 11540-11544 (1991).
152. Carson, M. dan Bugg, C. E. Analisis tulang punggung protein. IEEE Computer Graphics & amp; Aplikasi, Vol. 12 (1), hlm. 11-13 (1992).
153. alick, S. E., Cook, W. J., Senadhi, V-K., Carson, M., Nagabhushan, T. L., Trotta, P. P. dan Bugg, C. E. Rekombinan manusia interferon-gamma の 三 次 元 構造。。。。。。。。。 構造。。 構造。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
154. Delucas 、 L. J. 、 Smith 、 C. D. 、 Carter 、 D. C. 、 Twigg 、 P. 、 He 、 X-m. A 、 Koszelak, S., Vandonselaar, M. M., Prasad, L., Quail, J. W., Delbaere, L. T. J. dan Bugg, C. E. Pertumbuhan kristal protein di atas pesawat pesawat ulang-alik A. S. STS-31 dan STS-32. Di ： adv. Space Res., Vol 123, (1) 393- (1) 400 (1992).
155. Walter, M. R., Cook, W. J., Ealick, S. E., Nagabhushan, T. L., Trotta, P. P. dan Bugg, C. E. Faktor perangsang koloni granulosit manusia rekombinan の 3 次元 構造 j. Mol. Biol. 224: 1075-1085 (1992).
156. Walter, M. R., Cook, W. J., Zhao, B-G., Cameron, R. P., Reichert, P., Nagabhushan, T. L., Trotta, P. P. dan Bugg, C. E. Struktur kristal interleukin manusia rekombinan-4. J. Biol. Chem. 267: 20371-20376 (1992).
157. Zhao, B-G., Carson, W. M., Ealick, S. E. dan Bugg, C. E. Struktur varian toksin Scorpion-3 pada resolusi 1. 2A. J. Mol. Biol. 227: 239-252 (1992).
