* Email: vcortes@med. puc. cl (VC); jsantos@med. puc. cl (JS) Afiliasi Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile / Departemen Gizi, Diabetes dan Metabolisme, Fakultas Kedokteran
Afiliasi Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile ˲ Departemen Gizi, Diabetes dan Metabolisme, Fakultas Kedokteran
Afiliasi Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile ˲ Departemen Gizi, Diabetes dan Metabolisme, Fakultas Kedokteran
Afiliasi Departemen Endokrinologi, Fakultas Kedokteran, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chili ˲ Santiago, Chili
Afiliasi Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile ˲ Departemen Gizi, Diabetes dan Metabolisme, Fakultas Kedokteran
* Email: vcortes@med. puc. cl (VC); jsantos@med. puc. cl (JS) Afiliasi Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile / Departemen Gizi, Diabetes dan Metabolisme, Fakultas Kedokteran
Congenital Generic Fat Nutrition (CGL) adalah penyakit pelerasi kromosom yang langka yang ditandai dengan penurunan ekstrem pada jaringan lemak putih (WAT). Jenis CGL1 adalah jenis penyakit yang paling sering dan disebabkan oleh mutasi AGPAT2. Penelitian genetik dan klinis dilakukan pada dua saudara perempuan keluarga Chili. Pasie n-pasien ini memiliki kelainan metabolisme yang sangat mirip yang berkorelasi dengan perbedaan level antara leptin yang bersirkulasi dan divisi reseptor leptin yang larut. Perbatasan Exon dan Exon-Intron Agpat2 telah mengungkapkan dua mutasi saudara perempuan pada kedua saudari. Miss Sense Mutation C. 299G & GT; C. 493-1g & gt; C Mutasi diperkirakan menghancurkan situs splicing yang disimpan, yang mengarah pada penghapusan Exon 4 Skip dan domain pengikat substrat Agpat2. Pemodelan protein i n-silico telah mengungkapkan mekanisme kurangnya aktivitas katalitik karena sensor bilateral.
Mengutip Cortés VA, Smalley SV, Goldenberg D, Lagos CF, Hodgson MI, Santos JL (2014) Gol ganda Gymnasium bawaan Bonded Congenital di antara dua saudara perempuan gimnasium bawaan saya melakukannya. Studi klinis, genetik dan dalam silico
Editor Cedric Moro, Inserm/UMR 1048, Prancis
Diterima: 15 Oktober 2013 Resepsi: Resepsi: 15 Oktober 2013;
Hak Cipta: © 2014 Cortés et al. .
Dana yang menyediakan dana Studi ini telah menerima dukungan hibah Fondecyt-Chile ke V. A. C.#11100168 dan J. L. S.#1120586 dan V. A. C. Tidak ada subsidi yang terlibat dalam desain penelitian, pengumpulan dan analisis data, keputusan pengumuman, dan pembuatan naskah.
Keuntungan kompetisi telah menyatakan bahwa tidak ada minat kompetitif.
Nutrisi lemak umum kongenital (CGL) atau sindrom Berardinelli-Spiip (OMIM # *608594) jarang terjadi di seluruh tubuh, yang jarang terjadi pada penurunan jaringan lemak putih yang jarang (WAT). CGL biasanya didiagnosis segera setelah lahir, dan orang yang terkena dampak mengalami diabetes untuk resistensi insulin, trigliseridemia tinggi, lemak hati dan onset dini. Empat sindrom CGL yang berbeda didefinisikan, tetapi 95 % dari kasus yang dilaporkan adalah CGL-1 atau CGL-2.
CGL-1 disebabkan oleh mutasi gen AGPAT2 [4] dan ditandai dengan penurunan signifikan dalam lemak subkutan dan visceral. Resistensi insulin yang serius, penurunan leptin dan adiponektin yang beredar adalah temuan khas, bersama dengan karakteristik gangguan raksasa canggih, hernier umbilikalis, dan lesi lokal dari tulang yang melekat [1], [3]. CGL2 disebabkan oleh mutasi gen BSCL2 [5] dan merupakan jenis repostrof sistemik yang paling parah. Pada pasien ini, baik WAT dan lemak mekanik tidak ada secara substansial, dan sering mengembangkan kecacatan intelektual sedang.
AGPAT2 terletak di kromosom 9Q34, dan kode 1-asylgricerol-3-fosfat O-Aslansferase 2. Enzim ini dikonversi menjadi asam lizhospachidic (LPA) menjadi asam fosfatidat (PA) dalam rute sintetis lipid denobo glisero. Mekanisme nutrisi lemak yang akurat pada pasien dengan mutasi gen AGPAT2 belum dijelaskan, tetapi mungkin kelainan baru karena transmisi sinyal lipid abnormal terlibat.
Di sini, kami akan melaporkan dua saudara perempuan dengan mutasi persimpangan homo ganda pada gen AGPAT2. The Sisters menunjukkan berbagai macam spektrum dan keparahan yang beragam di CGL1. Kami juga menganalisis potensi dampak struktural dan fungsional dari mutasi ini pada AGPAT2.
Pasien yang dilaporkan adalah saudara perempuan, lahir dari orang tua yang tidak memiliki hubungan keluarga (sepupu tingkat pertama) dan berasal dari Chili bagian selatan. Keempat kakek neneknya lahir di Chili dan memiliki nama keluarga Spanyol. Nenek dari pihak ibu adalah saudara perempuan dari kakek dari pihak ayah pasien, dan tidak ada kasus CGL yang teridentifikasi pada saudara kandungnya. Tujuan penelitian dijelaskan kepada pasien, dan mereka menandatangani persetujuan yang sebelumnya ditinjau dan disetujui oleh Komite Etik Penelitian Pontificia Universidad Católica de Chile. Penelitian ini dilakukan setelah mendapat persetujuan tertulis dari komite etika Pontificia Universidad Católica de Chile dan Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología (Fondecyt). Kedua pasien membaca, berdiskusi, dan memahami teks dan gambar yang menyusun naskah ini bersama penulis (V. A. C.). Para pasien yang termasuk dalam naskah ini memberikan persetujuan tertulis untuk publikasi rincian kasus mereka.
Semua pengukuran biokimia darah dan hormonal dilakukan setelah puasa 12 jam. Leptin, fraksi larut reseptor leptin (LepRs), dan interleukin-6 (IL-6) diukur dengan ELISA (Quantikine, R& amp; D, Minneapolis, MN). Adiponektin diukur dengan RIA (Millipore, MI). Hormon tiroid, testosteron, SHBG, insulin, dan glukosa plasma, kolesterol, trigliserida, kreatinin, kolesterol HDL, HbA1c, dan transaminase diukur dengan prosedur dan teknik laboratorium standar di Laboratorium Pusat Pontificia Universidad Católica de Chile.
DNA genom diekstraksi dari seluruh darah menggunakan QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Hilden, Jerman). Keenam ekson, batas ekson-intron, dan daerah 5′ dan 3′ UTR dari gen AGPAT2 diamplifikasi dengan reaksi berantai polimerase (urutan primer tercantum pada Tabel 1). Produk PCR diurutkan secara langsung (Macrogen, Korea). Urutan yang diperoleh dibandingkan dengan referensi transkrip AGPAT2 ID yang diterbitkan (ENST 00000371696) menggunakan ChromasPro 1. 5 (Technelysium, Australia). Variasi urutan diberi nama sesuai dengan rekomendasi dari Human Genome Variation Society (11). Analisis mutasi intron dilakukan dengan menggunakan mesin Human Splice Finder (//www. umd. be/HSF/), yang memprediksi kemungkinan kelainan penyambungan. Nilai konsensus ditetapkan ke lokasi sambungan alami (5′ dan 3′), titik cabang, dan peningkat sambungan eksonik. Nilai konsensus delta kekuatan lokasi sambungan (ΔCV) lebih besar dari 10% kemungkinan akan menentukan variasi penyambungan [12].
slide powerpoint Gambar diperbesar BERTENGKAR gambar asli Tabel 1. Primer PCR yang digunakan untuk pengurutan batas ekson-intron AGPAT2.
Untuk menilai potensi dampak biologis dari mutasi missense pada fungsi AGPAT2, kami menggunakan Polyphen-2 v. 2. 2r398 [13] dan Provean (Protein Variant Effect Analyzer) v. 1. 1. 3 [14]. Provean adalah biner yang efek mutasinya bersifat netral atau merugikan, sedangkan Polyphen menampilkan skor antara 0 dan 1, dengan 1 sebagai skor tertinggi dan paling merugikan.
Model tiga dimensi AGPAT2 manusia dibuat menggunakan teknik pemodelan komparatif menggunakan struktur kristal Curcubita moschata gliserol-3-fosfat asiltransferase (cmGPAT) sebagai templat. (Nomor akses UniProt O15120 dan P10349). Penyelarasan urutan hAGPAT2 dan cmGPAT dilakukan menggunakan ClustalX v2. 0 menggunakan matriks blosum62 [15], [16]. Penyelarasan awal selanjutnya dikoreksi secara manual untuk menghindari kesenjangan dalam residu fungsional kritis menggunakan Modeller yang diterapkan dalam protokol Build Homology Model yang tersedia di Discovery Studio v2. 1 (Accelrys Inc., San Diego, USA). . Gambar diberikan menggunakan Pymol v1. 4 (Schrödinger, LLC).
Seorang wanita 29 tahun yang dilahirkan di antara orang tua terkait darah (sepupu pertama). Ia dilahirkan dalam produksi reguler (39 minggu), tetapi berat badan dan tingginya saat lahir tidak diketahui. Pasien 1 didiagnosis dengan diabetes atrofi lemak pada usia 13, kelainan lipid (total kolesterol = 960 mg/dL, trigliserida = 4. 355 mg/dL), dan hati berlemak. Sampai sekarang, telah diobati dengan asupan makanan dan asupan karbohidrat, obat yang sensiti f-insulin (rosiglitazone atau metaformin), inhibitor DPP IV (cytagripitin), dan berbagai kombinasi insulin, tetapi kontrol gula darah dan lipid adalah kontrolnya buruk (Tabel 2). Sebelum evaluasi ini, tidak ada perawatan farmakologis khusus yang diambil untuk mengendalikan lipid plasma. Setelah pengisian insulin, lesi kulit papiles kekuningan di bagian belakang dan wajah secara tidak sengaja muncul. Karena komplikasi ini, dia menghentikan pengobatan insulin empat tahun lalu. Pasien juga mengeluh beberapa nyeri sendi dan kekakuan di pagi hari tangan dan lutut, tetapi tidak memiliki tand a-tanda radang lokal. Siklus menstruasi tidak teratur, dan periode menstruasi sangat panjang (beberapa tahun). Dalam temuan fisik, tinggi (1, 6m) normal, berat badan rendah (indeks tubuh, BMI, 18, 3kg/m2), sistemik, pengurangan lemak subkutan yang parah, karakteristik raksasa canggih (pr a-claps dan pembesaran anggota badan), serviks Parent terkait (sepupu kelas pertama (sepupu induk pertama), yang menunjukkan kemungkinan ruam kuning, dengan epidema hitam di pangkal paha dan jarang merah muda pink, jarang kekuningan dan kekuningan.) Seorang wanita 29 tahun lahir. Ia dilahirkan dalam produksi reguler (39 minggu), tetapi berat badan dan tingginya saat lahir tidak diketahui. Pasien 1 didiagnosis dengan diabetes atrofi lemak pada usia 13, kelainan lipid (total kolesterol = 960 mg/dL, trigliserida = 4. 355 mg/dL), dan hati berlemak. Sampai sekarang, telah diobati dengan asupan makanan dan asupan karbohidrat, obat yang sensiti f-insulin (rosiglitazone atau metaformin), inhibitor DPP IV (cytagripitin), dan berbagai kombinasi insulin, tetapi kontrol gula darah dan lipid adalah kontrolnya buruk (Tabel 2). Sebelum evaluasi ini, tidak ada perawatan farmakologis khusus yang diambil untuk mengendalikan lipid plasma. Setelah pengisian insulin, lesi kulit papiles kekuningan di bagian belakang dan wajah secara tidak sengaja muncul. Karena komplikasi ini, dia menghentikan pengobatan insulin empat tahun lalu. Pasien juga mengeluh beberapa nyeri sendi dan kekakuan di pagi hari tangan dan lutut, tetapi tidak memiliki tand a-tanda radang lokal. Siklus menstruasi tidak teratur, dan periode menstruasi sangat panjang (beberapa tahun). Dalam temuan fisik, tinggi (1, 6 m) normal, berat badan rendah (indeks tubuh, BMI, 18, 3kg/m2), sistemik, pengurangan lemak subkutan yang parah, karakteristik raksasa canggih (pr a-claps dan pembesaran anggota badan), serviks Dari klub dan bagian pangkal paha, binti k-bintik kecil yang kekuningan dan kekuningan yang kekuningan, dan orang tua yang berhubungan dengan orang tua (sepupu orang tua pertama), menyarankan kemungkinan ruam kuning. Ia dilahirkan dalam produksi reguler (39 minggu), tetapi berat badan dan tingginya saat lahir tidak diketahui. Pasien 1 didiagnosis dengan diabetes atrofi lemak pada usia 13, kelainan lipid (total kolesterol = 960 mg/dL, trigliserida = 4. 355 mg/dL), dan hati berlemak. Sampai sekarang, telah diobati dengan asupan makanan dan asupan karbohidrat, obat yang sensiti f-insulin (rosiglitazone atau metaformin), inhibitor DPP IV (cytagripitin), dan berbagai kombinasi insulin, tetapi kontrol gula darah dan lipid adalah kontrolnya buruk (Tabel 2). Sebelum evaluasi ini, tidak ada perawatan farmakologis khusus yang diambil untuk mengendalikan lipid plasma. Setelah pengisian insulin, lesi kulit papiles kekuningan di bagian belakang dan wajah secara tidak sengaja muncul. Karena komplikasi ini, dia menghentikan pengobatan insulin empat tahun lalu. Pasien juga mengeluh beberapa nyeri sendi dan kekakuan di pagi hari tangan dan lutut, tetapi tidak memiliki tand a-tanda radang lokal. Siklus menstruasi tidak teratur, dan periode menstruasi sangat panjang (beberapa tahun). Dalam temuan fisik, tinggi (1, 6m) adalah normal, berat badan rendah (indeks tubuh, BMI, 18, 3kg/m2), seluruh tubuh, lemak subkutan yang parah, karakteristik besar canggih (pr a-akademik dan hipertrofi ekstremitas), serviks Dari bagian dan bagian pangkal paha, lesi kulit kekuningan dan jarang merah muda di bagian belakang, menyarankan kemungkinan ruam kuning.
slide powerpoint Gambar diperbesar BERTENGKAR gambar asli
gambar asli
Tabel 2. Karakteristik biokimia, hormonal, komposisi tubuh, dan pengeluaran energi dari dua saudara perempuan dengan CGL1.
Seorang wanita 26 tahun, seorang saudara perempuan pasien. Ia dilahirkan pada kelahiran prematur (36 minggu), tetapi tidak ada data tentang kelahiran dan tinggi ketika ia dilahirkan. Pasien 2 didiagnosis dengan hipertrikliseridemia pada usia lima tahun dan hiperglikemik pada usia 19. Awalnya, penyakit pasien diakui sebagai diabetes tipe 2, dan diobati dengan pembatasan diet dan karbohidrat, dan jumlah maksimum metformin. Dia menunjukkan tipe ekspresi yang berkelanjutan dan luar biasa, tetapi tidak didiagnosis dengan repositori. Menarche berusia 12 tahun, dan tidak teratur. Pada usia 14, ia didiagnosis dengan sindrom ovarium polikistik dan diberikan kontrasepsi oral pada berbasis estrogen. Dengan perawatan ini, trigliserida dalam plasma meningkat secara signifikan, dan lesi kulit darcardy seperti binti k-bintik muncul, dan didiagnosis dengan ruam yelloma. Dengan komplikasi ini, ia membatalkan kontrasepsi oral. Tidak ada kelainan lain yang diamati. Dalam temuan fisik, Wat subkutan dari seluruh tubuh berkurang secara signifikan, dan karakteristik otot raksasa diamati. Tes darah biokimia menunjukkan diabetes, dislipidemia campuran, dan kenaikan ringan SGOT dan SGPT (Tabel 2). Pembersihan kreatinin adalah 152, 6ml/min/1. 73m2, dan proteinuria adalah 0, 063g/24 jam (Tabel 2). Dalam analisis hormon, fungsi tiroid normal, testosteron naik secukupnya, dan SHBG normal (Tabel 2). Leptin dalam plasma tinggi.
Selama persiapan naskah, Pasien 2 telah hamil tanpa komplikasi, dan mampu memberikan janin betina 3. 415 g, kedewasaan, ekspresi normal, dan 3. 415 g. Kontrol gula darah selama kehamilan dicapai pada 1. 700 mg/ hari karbohidrat makanan dan metaformin. Insulin (NPH Insulin 10 Unit/ hari) hanya digunakan selama dua minggu terakhir kehamilan. HBA1C pada saat pengiriman adalah 6, 7 % dan gula darah lapar adalah 115 mg/dL.
slide powerpoint Gambar diperbesar BERTENGKAR gambar asli gambar asli
Gambar 1. Mutasi ganda AGPAT2 pada dua saudara perempuan dengan CGL.
A) Pasien 1 (P1) dan pasien 2 (P2) memiliki substitusi nukleotida tunggal c. 299G& gt; A pada ekson 2 gen AGPAT2 (panah hitam). Akibatnya, kodon tipe liar AGC (tidak ditampilkan), yang mengkode serin, diubah menjadi AAC (bergaris bawah), yang mengkode asparagin. B) Pasien 1 (P1) dan pasien 2 (P2) juga memiliki substitusi nukleotida tunggal c. 493-1G& gt; C (panah hitam) pada batas intron 3-ekson 4. * menunjukkan nukleotida pertama ekson 4.
Potensi dampak mutasi p. Ser100Asn pada fungsi protein AGPAT2 dievaluasi menggunakan algoritma Polyphen [13] dan Provean [14]. Analisis Polyphen menilai mutasi ini sebagai “mungkin merusak” dengan skor 0, 995, sementara Provean menilainya “fulminan.”
Mutasi homozigot kedua, substitusi G dan C pada posis i-1 intron 3 (c. 493-1G& gt; C), diamati pada kedua pasien (Gambar 1B).
Seperti yang diharapkan, orang tua pasien adalah heterozigot untuk dua mutasi ini, dan variasi urutan ini tidak ada pada 50 subjek kontrol yang tidak berhubungan (data tidak ditampilkan).
C. 493-1g & gt; Diindikasikan bahwa perubahan yang sama menentukan kelainan pemrosesan pr e-mRNA dan sering membawa kipping Exonson. Oleh karena itu, menggunakan perangkat lunak online Human Splicing Finder (HSF), C. 493-1G & GT; Analisis ini mengungkapkan bahwa ΔCV dari situs spracing 3 ‘aksesor adala h-31 % (tipe liar = 93, 26 vs mutan = 64, 31). Dalam algoritma ini, jika ΔCV lebih besar dari 10 %, itu dianggap sebagai faktor prediksi untuk splicing mutasi. Algoritma HSF kedua, Maxent, menunjukkan fluktuas i-81, 4 % dalam intensitas situs sambungan, yang juga menyarankan splicing Xon 4 yang salah selama pemrosesan pr a-mRNA AGPAT2. Oleh karena itu, c. 493-1g & gt; Yang penting adalah bahwa penghapusan ekson 4 tidak menggeser slot pembacaan mRNA Agpat2, sehingga tidak memiliki semua segmen antara residu P. 165Leu dan residu P. 196GLN, 246 asam amino daripada mutan agpat2 liar Produk protein pendek. Yang penting adalah bahwa segmen ini berisi domain PEGTR yang disimpan. Diakui bahwa domain ini sangat penting untuk semua anggota keluarga ini untuk metastasis Asy l-COA.
slide powerpoint Gambar diperbesar BERTENGKAR gambar asli Gambar asli
Gambar 2. Pemodelan molekuler HAGPAT2.
A) Ekspresi struktur sekunder protein AGPAT2 manusia yang dimodelkan. Hijau adalah segmen antara Leu165 dan ALA195, yang mengandung motif pengikat asylglycerol-3-fosfat (PEGTR), dan dikodekan oleh Xon 4. Segmen ini hilang di C. 493-1g & gt; B) Snapshot interaksi interkolin antara LPA (C18 “1) dan AGPAT2 manusia. Bagian kutub substrat bersentuhan dengan gugus residu dasar, dan rantai alkil adalah terowongan yang terdiri dari rantai samping asam amino hidrolik. Ditempatkan di.
Ini adalah laporan pertama pasien cabai dengan reposerostrof sistemik bawaan. Populasi Chili adalah genetik, berbagai orang India Amerika dan belahan bumi utara, terutama orang Eropa selatan (Spanyol, Italia), Eropa utara (Jerman), Timur Tengah (Palestina, Suriah) ada kontribusi. Menariknya, pasien dengan mutasi gen AGPAT2 yang dilaporkan di masa lalu terutama dari Afrika, Timur Tengah, dan Eropa Utara, selatan Sahara. Semua nenek moyang pasien yang diketahui dilaporkan kali ini lahir di Chili dan merupakan nama keluarga Spanyol, menunjukkan bahwa mereka memiliki heterogenitas genetik yang sama dengan kelompo k-kelompok Chili lainnya.
Secara klinis, kasu s-kasus ini menunjukkan ukuran spektrum kelainan metabolik karena penurunan persentase lemak tubuh. Namun, tidak dapat dipahami bahwa kedua saudari itu melaporkan kali ini memiliki kelainan gen Agpat2 yang sama dan keparahan komplikasi metabolisme berbeda meskipun nutrisi fatal yang sama. Faktanya, Pasien 1 mengembangkan gula darah / dislipidemia yang parah, komplikasi hypovavesal retina dan ginja l-ginjal, dan kepadatan yang berkelanjutan, sementara pasien 2 hanya memiliki kelainan metabolisme ringan hingga sedang, dan fisiologis. Faktor dan mekanisme yang mendasari perbedaan tersebut masih belum diketahui. Namun demikian, perlu dicatat bahwa pada jenis ekspresi yang paling parah (Pasien 1), kadar leptin yang beredar total rendah dan kadar reseptor leptin yang larut tinggi. Kami berspekulasi bahwa perbedaan leptin sirkulasi bebas mungkin telah menentukan perbedaan ekspresi metabolisme yang penting secara klinis antara pasien CGL1 ini. Berbeda dengan kasus CGL yang dilaporkan sebelumnya, juga terkenal bahwa Pasien 1 tidak memiliki temuan penyakit hati berlemak. Ini mungkin disebabkan oleh efek kombinasi antara asupan lemak rendah dan lemak Denovo hati yang didorong oleh insulin rendah.
Dari sudut pandang genetik, sangat misterius bahwa dua mutasi abadi yang berpotensi hidup berdampingan pada gen yang sama. Mutasi gabungan seperti itu diakui oleh pasien CGL Argentina. C. 299G & GT;
Mekanisme lipodistrofi pada pasien dengan mutasi pada gen AGPAT2 masih belum jelas. Karena AGPAT penting untuk biosintesis gliserofosfolipid dan trigliserida, masuk akal untuk berasumsi bahwa kehilangan lemak adalah akibat dari penurunan sintesis produk lipid ini. Namun beberapa fakta menunjukkan bahwa hipotesis sederhana ini tidak dapat dijelaskan sepenuhnya. Pertama, dua isoform AGPAT utama (1 dan 2) diekspresikan dalam adiposit putih matang, dan ketika ditandai dan diekspresikan bersama dalam sel yang dikultur, mereka berikatan dengan subdomain yang sama dari retikulum endoplasma (8). Selain itu, aktivitas katalitik AGPAT1 dan AGPAT2 sangat mirip dalam hal preferensi substrat dan sifat kinetik [8]. Oleh karena itu, tidak jelas mengapa defisiensi AGPAT1 tidak mengkompensasi defisiensi AGPAT2 pada adiposit. Banyak mutasi yang dilaporkan pada gen AGPAT2 mengakibatkan penurunan protein dan/atau tingkat aktivitas AGPAT2 [22, 23], menunjukkan bahwa aktivitas AGPAT diperlukan untuk massa WAT normal. Memang benar, penghapusan total AGPAT2 menghasilkan fenotip CGL yang parah pada tikus [24, 25]. Hipotesis utama adalah bahwa AGPAT2 diperlukan untuk adipogenesis normal, kemungkinan dengan menghasilkan molekul pensinyalan lipid normal yang diperlukan untuk diferensiasi adiposit [10].
Substitusi G ke C pada posis i-1 intron 3 (c. 493-1G& gt; C) dapat mengakibatkan penghapusan seluruh ekson 4 karena penyambungan pra-mRNA AGPAT2 yang menyimpang. Faktanya, analisis menggunakan dua algoritma HSF memperkirakan bahwa mutasi ini kemungkinan besar merupakan kelainan penyambungan. Meskipun prediksi ini belum diverifikasi secara eksperimental, hal ini dapat mengakibatkan penghapusan 32 asam amino dalam bingkai yang mencakup motif PEGTR yang sangat terpelihara yang terdapat dalam enzim GPAT, AGPAT, DHAPAT, dan LPEAT [26].
Motif PEGTR sangat penting untuk aktivitas katalitik asiltransferase [18]. Memang, Arg175 telah terbukti diperlukan untuk mengikat bagian bermuatan substrat sn-gliserol-3-fosfat dari keluarga enzim ini [26, 27]. Oleh karena itu, penghapusan total Leu165-Ala195 seharusnya tidak mempengaruhi pelipatan AGPAT2 global, namun mungkin berdampak signifikan pada pengikatan substrat, yang mengakibatkan hilangnya aktivitas katalitik.
Mutasi lain yang diamati pada pasien yang dilaporkan (c. 299G& gt; A) selanjutnya dapat mempengaruhi katalisis enzim dalam dua cara berbeda. Pertama, pembentukan ikatan hidrogen intramolekul antara Ser100 dan Asp103 yang dilestarikan, yang penting untuk sistem relai muatan katalis His98 yang dilestarikan, dihambat [26]. Kedua, rantai samping Asn yang besar dapat meningkatkan hambatan sterik pada kantong katalitik, mengganggu topologinya, dan mengurangi aktivitas asiltransferase.
Studi fungsional dan biokimia diperlukan untuk mengevaluasi secara empiris efek mutasi ini terhadap aktivitas enzimatik AGPAT2 dan adipogenesis.
Таким образом, с собщаем о первых д д с счч к ччн эо ини нutu эюю уutu эююю уарю уаilat эю. но метабоedit ция c. 493-1g & gt; C омена белка AGPAT2, в то время как мутация c. 299G& gt;
